2010-04-06
org.kosen.entty.User@719d2402
김수영(ponicon)
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GAL4 AD system 사용하고 있습니다.
균주는 HF7c(T,L 생성)를 사용하고 있는데 co-transformation 이후 -TL 배지에서 키워보면 콜로니가 잘 뜨지를 않습니다.. 당연히 떠야 하는 배지인데요 ..
액체 배지에 pre culture하여 메인컬쳐에 접종하는데 5ml/100ml 접종하구요
플레이트에 긁어놓고 시간이 많이 지난 것을 사용하였는데 .. 그래서 그런지 메인 컬쳐시 시간이 많이 걸렸습니다..(6시간 정도)
-TL 스프레딩 이후 약 3.5일 정도 지났는데 아주 자잘한 콜로니들이 뜨고 있는데 이게 맞는지 (제가 경험이 많이 없어서)모르겠어요 .. yeast가 맞는지 확인하는 법은 없나요 ?
yeast 용 배지나 균주는 어떻게 보관해야 하는지도 좀 알려주세요 ~ ㅠㅠ
- Y2H
- yeast two hybrid
- yeast
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답변 1
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답변
오용식님의 답변
2010-04-09- 0
저의 경우, Yeast가 맞는지 확인할 때 주로 현미경 관찰을 합니다. bacteria보다 크기가 크기 때문에 쉽게 알아볼 수 있죠, 그리고, 세포가 budding을 통하여 번식 중인지도 확인을 함으로써 구분이 가능하죠... 염색을 하고 현미경 관찰하는 방법도 있습니다.... 염색 방법은 많이 있으니까 찾아보심이... (저는 염색까지는 안합니다..;;) plate상에서 알아볼 수 있는 것은... 아무래도 냄새를 맡음으로써 알수 있죠... yeast 고유의 그...술빵 냄새(?)라고 할까요? 저는 보통 이 두 가지 정도로 확인을 하고요, genotype을 알고 있으면, amino acid를 각각 달리한 최소 배지에 접종하여서 genotype이 제대로 맞는지도 확인함으로써 알 수 있죠... Yeast랑 bacteria랑은 확실히 다르니 구분이 금방 가실거에요, 도움 되셨기를.. >GAL4 AD system 사용하고 있습니다. >균주는 HF7c(T,L 생성)를 사용하고 있는데 co-transformation 이후 -TL 배지에서 키워보면 콜로니가 잘 뜨지를 않습니다.. 당연히 떠야 하는 배지인데요 .. > >액체 배지에 pre culture하여 메인컬쳐에 접종하는데 5ml/100ml 접종하구요 >플레이트에 긁어놓고 시간이 많이 지난 것을 사용하였는데 .. 그래서 그런지 메인 컬쳐시 시간이 많이 걸렸습니다..(6시간 정도) > >-TL 스프레딩 이후 약 3.5일 정도 지났는데 아주 자잘한 콜로니들이 뜨고 있는데 이게 맞는지 (제가 경험이 많이 없어서)모르겠어요 .. yeast가 맞는지 확인하는 법은 없나요 ? > >yeast 용 배지나 균주는 어떻게 보관해야 하는지도 좀 알려주세요 ~ ㅠㅠ
늦게나마 감사합니다 ^^