2010-05-19
org.kosen.entty.User@40ea2002
박송이(lixxyyxxil)
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안녕하세요
제가 confocal을 이용하여 triple staining을 해보려고 합니다.
현재 가지고 있는 2차 형광 안티바디는
Alexa 488 anti-mouse와 Alexa 546 anti-rabbit이 있습니다.
또한 DAPI를 이용하여 핵 염색도 진행하고 있습니다.
그래서 다른 파장대를 anti-goat로 찾아보았는데
633, 647, 660, 680nm의 파장대가 있는데
어떤것을 사용해야 위에것들과 중복이 되지 않는지를 모르겠습니다.
또 triple staining을 한다면 2차 안티바디를 붙일때 세가지를 한번에 붙여야 하는것인지요?
- triple staining
- alexa
- DAPI
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답변 1
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답변
이동원님의 답변
2010-05-20- 0
cy5와 같은 far-red계열의 dye를 사용하시면 되구요, 설사 ex/em 하나가 다른 것과 겹친다 해도 lsm510 meta이상에서는 lamda mode를 사용하시면 software적으로 구별할수 있습니다. 물론 세가지를 동시에 사용하는 것이 가능합니다, 하지만 각각을 염색한 control을 함께 실험해야 되겠지요. 좋은 하루 되세요. >안녕하세요 > >제가 confocal을 이용하여 triple staining을 해보려고 합니다. > >현재 가지고 있는 2차 형광 안티바디는 > >Alexa 488 anti-mouse와 Alexa 546 anti-rabbit이 있습니다. > >또한 DAPI를 이용하여 핵 염색도 진행하고 있습니다. > >그래서 다른 파장대를 anti-goat로 찾아보았는데 > >633, 647, 660, 680nm의 파장대가 있는데 > >어떤것을 사용해야 위에것들과 중복이 되지 않는지를 모르겠습니다. > >또 triple staining을 한다면 2차 안티바디를 붙일때 세가지를 한번에 붙여야 하는것인지요?