2010-06-02
org.kosen.entty.User@290df7b1
이재일(lji1928)
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제가 cloning을 하고 난 다음에 정량을 하기 위해 PCR을 하면 밴드가 다 나오거나
real-time PCR을 하고 하면 너무 늦은 cycle에서 빛이 나옵니다.
25cycle에서 나오던 빛이 35cycle에서 나옵니다. 40cycle다 완료이고요 35~40에서 빛이 다 나오고 있습니다.
cloning전에 잡았던 조건으로 하니깐 좋지 않은 결과가 나오는데
cloning후에 조건을 변화을 줘야하나요?
여기서 cloning은 원래 잡았던 product 범위보다 좀 더 범위가 넓은 primer을 제작하여 증폭시켜서 원해 product 범위를 가지고 있는 DNA가닥을 cloning하여 그것을 스펙을 제서 정량을 측정하였고 다시 pcr의 민감도를 측정하는 실험입니다. 근데 앞에서 말한것과 같이 cloning전의 조건으로 하면 너무 불규칙적인 결과가 나오고 real-time의 경우에는 25cycle에서 나오던 그래프가 35cycle에서 나오고 있습니다. 너무 답답해서 글을 올립니다.
- cloning
- PCR
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