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hygromycin screening

식물 세포에 형질전환하기 위해 항생제 농도 스크리닝 실험을 진행했습니다 주목 캘러스를 사용해서 실험을 했는데 저농도에서는 캘러스가 죽는 양상이 보여서 이 농도로 형질전환된 캘러스를 선별하면 되겠다 싶었는데 고농도에서 어떻게 되는지 보려고 캘러스를 접종해 봤습니다 그런데 죽지 않고 살아 있는거 아닙니까? 형질전환되지 않은 캘러스의 항생제 농도 스크리닝 실험에서 고농도에서 죽는다는 얘기는 들어봤고 실제 저도 계속적으로 그렇게 스크리닝했는데 이번에는 결과가 완전 다릅니다 저농도에서는 죽고 그 이상의 농도에서는 오히려 캘러스가 살아 있는데 이런 현상 혹시 보신 분이나 아시는 분 계세요?
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답변 1
  • 답변

    정진욱님의 답변

    >식물 세포에 형질전환하기 위해 항생제 농도 스크리닝 실험을 진행했습니다>>주목 캘러스를 사용해서 실험을 했는데>저농도에서는 캘러스가 죽는 양상이 보여서 >이 농도로 형질전환된 캘러스를 선별하면 되겠다 싶었는데>>고농도에서 어떻게 되는지 보려고 캘러스를 접종해 봤습니다>그런데 죽지 않고 살아 있는거 아닙니까?>>형질전환되지 않은 캘러스의 항생제 농도 스크리닝 실험에서>고농도에서 죽는다는 얘기는 들어봤고>실제 저도 계속적으로 그렇게 스크리닝했는데>이번에는 결과가 완전 다릅니다>>저농도에서는 죽고 그 이상의 농도에서는 오히려 캘러스가 살아 있는데>이런 현상 혹시 보신 분이나 아시는 분 계세요? 하이그로마이신의 경우 농도 차이를 주는 것에 덧붙여 암조건 기간도 한번 조절해 보시길 권해 드립니다. 제 경우 고농도에서 선별이 되지 않아 원글님처럼 저농도로 낮추어 봤지만 선별되지 않았습니다. 그런데 고농도에서 암조건 4일을 주고 난 배지에서 선별을 하였습니다. 물론 이 것은 저의 경험임을 다시 한번 강조드립니다.
    >식물 세포에 형질전환하기 위해 항생제 농도 스크리닝 실험을 진행했습니다>>주목 캘러스를 사용해서 실험을 했는데>저농도에서는 캘러스가 죽는 양상이 보여서 >이 농도로 형질전환된 캘러스를 선별하면 되겠다 싶었는데>>고농도에서 어떻게 되는지 보려고 캘러스를 접종해 봤습니다>그런데 죽지 않고 살아 있는거 아닙니까?>>형질전환되지 않은 캘러스의 항생제 농도 스크리닝 실험에서>고농도에서 죽는다는 얘기는 들어봤고>실제 저도 계속적으로 그렇게 스크리닝했는데>이번에는 결과가 완전 다릅니다>>저농도에서는 죽고 그 이상의 농도에서는 오히려 캘러스가 살아 있는데>이런 현상 혹시 보신 분이나 아시는 분 계세요? 하이그로마이신의 경우 농도 차이를 주는 것에 덧붙여 암조건 기간도 한번 조절해 보시길 권해 드립니다. 제 경우 고농도에서 선별이 되지 않아 원글님처럼 저농도로 낮추어 봤지만 선별되지 않았습니다. 그런데 고농도에서 암조건 4일을 주고 난 배지에서 선별을 하였습니다. 물론 이 것은 저의 경험임을 다시 한번 강조드립니다.

    좋은 답변 감사드립니다
    답변해 주신 것으로 봐서는 명배양하는 캘러스에 대한 경험을 조언해 주신 것으로 사료되는데
    혹시 암배양한 캘러스에 대해서는 경험이 없으신지요...

    짧은 경험이 후회스럽네요.. 조직배양에서 optimization 과정이 계속 말려버리면 스트레스가 상당하실 텐데.. 부디 현명한 solution 찾으시길 바랍니다..