2010-07-02
org.kosen.entty.User@2b2caee9
김정현(hyeon4448)
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안녕하세요~
저는 세포실험을 이제 막 시작하고 있는 학생인데요.
실험을 하다가 자꾸만 곰팡이가 생겨 걱정이 많습니다 ㅠㅠ
처음에는 1plate에만 생기다가 지금은 거의 전멸입니다 ㅜㅜ
저번에 한번 생겨서
세제로 한번, 알코올로 한번, 토치로도 한번 청소를 했는데도
생기기 시작하네요;;
랩에서 몇 개월 전 하던 곰팡이 실험도 중단한 상태인데 ;;
어찌 해야 할지 모르겠습니다.
더 확실하게 곰팡이를 없앨 수 있는 방법이 있을까요?
답변 부탁드립니다 ㅜ
- 곰팡이
- 제거
- 세포실험
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변 2
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답변
유용규님의 답변
2010-07-06- 0
클린벤치만 청소한다고 되는게 아니구요... 곰팡이 포자들로 실험실이 오염되어 있는거니깐... 실험기구들부터 모두 다 소독을 실시해야하는데.. 얘들이 잘 안죽거든요.... 저도 한동안 곰팡이 실험을 하다가 중단한적이 있었는데.... 제경험으로는 락스 희석액으로 바닥부터 실험대 등등을 다 닦아내고 수시로 환기하고.. 실험기구(micropipette 등)도 다 소독하고 해서 해결했던 적이 있습니다. 그리고 세포배양기 필터부위가 오염되어도 곰팡이나 박테리아에 의한 오염이 일어날 수 있습니다. 배양기 필터부위도 수시로 청소하세요 >안녕하세요~ >저는 세포실험을 이제 막 시작하고 있는 학생인데요. > >실험을 하다가 자꾸만 곰팡이가 생겨 걱정이 많습니다 ㅠㅠ >처음에는 1plate에만 생기다가 지금은 거의 전멸입니다 ㅜㅜ >저번에 한번 생겨서 >세제로 한번, 알코올로 한번, 토치로도 한번 청소를 했는데도 >생기기 시작하네요;; > >랩에서 몇 개월 전 하던 곰팡이 실험도 중단한 상태인데 ;; >어찌 해야 할지 모르겠습니다. > >더 확실하게 곰팡이를 없앨 수 있는 방법이 있을까요? >답변 부탁드립니다 ㅜ -
답변
신동준님의 답변
2010-07-13- 0
>안녕하세요~ >저는 세포실험을 이제 막 시작하고 있는 학생인데요. > >실험을 하다가 자꾸만 곰팡이가 생겨 걱정이 많습니다 ㅠㅠ >처음에는 1plate에만 생기다가 지금은 거의 전멸입니다 ㅜㅜ >저번에 한번 생겨서 >세제로 한번, 알코올로 한번, 토치로도 한번 청소를 했는데도 >생기기 시작하네요;; > >랩에서 몇 개월 전 하던 곰팡이 실험도 중단한 상태인데 ;; >어찌 해야 할지 모르겠습니다. > >더 확실하게 곰팡이를 없앨 수 있는 방법이 있을까요? >답변 부탁드립니다 ㅜ 곰팡이의 경우 균사체가 문제가 아니라 spore가 가장 치명적입니다. autoclave에도 별 효과가 없을 정도입니다. 그래서 한 번 오염되면 제거가 잘 안되는 이유가 여기에 있습니다. 끈질긴 생명력을 자랑하는 spore는 autoclave -> cooling을 두 세번 반복해야 겨우 잡힐 듯 말 듯 합니다. 먼저 새로운 plate나 30mm dish에 현재 사용중인 미디어 성분만 넣고 반드시 이웃실험실의 양해를 얻어 오염이 없는 배양기와 현재 오염이 잘 유발되고 있는 귀하의 배양기에서 각각 배양해보고 오염유무를 체크해보세요. 배양중인 세포의 cryo stock에서 유래된 것이지 오염된 미디어에서 온 것인지 배양과정에서 오염된 것인지를... 배양과정으로 의심이 된다면 오염원을 찾아보세요 1. 클린벤치 -> 필터교체 유무 2. 초자기구나 미디어 및 PBS 병 -> 과거 곰팡이 오염유무 3. CO2 배양기 등등 -> 내부 1의 경우 클린벤치 내부 락스 청소, 장기간 자외선 조사 및 필터 교환 2의 경우 지금 사용중인 모든 용기나 초자기구들을 모두 새것으로 교체 과거에 곰팡이에 오염된 적이 있던 것을 그냥 washing하고 autoclave해서 재활용하고 있는지 여부 확인하여 모두 버리거나 간헐 멸균법으로 세번정도 반복하세요. 일회용으로 사용중이시라면 해당사항이 없으므로 통과 3. 배양과정에서 CO2 배양기 내부 이것이 제일 확률이 높을 것 같습니다. 내부를 해체해서 확인해보세요 아마 곰팡이가 생장하고 있을 확률이 높습니다. 혹시 그렇다면 먼저 배양기의 Co2 밸브를 잠그고 나서 락스를 증류수에 1/10로 희석하여 스프레이에 담아 분사시키면서 핸드타올로 닦아내세요. 거의 제거 되었다 싶어도 두어번 정도 더 반복하세요 이래도 나중에 다시 성장합니다. 주기적으로 한 달에 한 번 정도는 락스 청소를 해주어야 합니다.
abiho님, 친절한 답변 감사드려요~ 락스 희석액이라, 님 말씀대로 대청소를 해봐야겠네요. 답변 감사드립니다~