2010-07-06
org.kosen.entty.User@dd4b6e4
이미진(myjc7)
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prep-lc 에서 분리하려면 RT가 얼마나 차이가 나야하나요??
일단 HPLC 에서 두 peak가 0.5분 차이나던 조건을 3분까지 떨어트렸는데요,
이 정도면 될까요?
아니면 더 떨어지는 조건을 잡아야하나요?
그렇다면 어느 정도 차이가 나야하나요
답변 부탁드리겠습니다.
- prep-lc
- RT
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답변 2
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답변
조윤환님의 답변
2010-07-06- 0
prep-LC로 분리하려면 가능한 RT 차이가 크면 좋습니다. 하지만 analytical column에서 차이가 많이 나도록 조건을 잡았다고 해서 동일한 결과를 얻을 수는 없는니다. prep-column으로 같은 정도의 resolution을 얻을 수는 없기 때문입니다. 때문에 보통은 한개의 피크를 여러 fraction으로 나누어 받게 됩니다. open column을 해서 분리할 때 처럼요. 제 생각에 3분까지 떨어트렸다면 분리하는데는 무리가 없어 보입니다. 하지만 prep-column을 사용할 경우 loading 농도가 높아지므로 겹칠 가능성에 대비하셔야 합니다. 가급적 피크 앞부분을 여러 fraction으로 나누어 받으시기 바랍니다. 뒷부분은 대부분 이어 나오는 피크와 겹치기 마련입니다. -
답변
이상후님의 답변
2010-07-07- 0
>prep-lc 에서 분리하려면 RT가 얼마나 차이가 나야하나요?? > >일단 HPLC 에서 두 peak가 0.5분 차이나던 조건을 3분까지 떨어트렸는데요, > >이 정도면 될까요? > >아니면 더 떨어지는 조건을 잡아야하나요? >그렇다면 어느 정도 차이가 나야하나요 > >답변 부탁드리겠습니다. 3분이면 충분하다고 봅니다. 두 peak 사이가 전혀 overlap되지 않는 시간이 3분이면 성공적으로 prep.되었다고 봅니다. 다만 두 peak가 baseline separation이 되어도 앞 peak의 뒷부분 1/3과 뒤 peak의 앞부분 1/3은 따로 분획해서 NMR 등으로 순도를 확인해야 됩니다.