2010-08-17
org.kosen.entty.User@396138de
이미진(myjc7)
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첨부파일
HPLC에서 column을 빼고 union 을 연결하여
HPLC system 전체를 wash 하려고 합니다
cell이 오염된거 같아서
25% IPA 로 1시간정도 wash 해주고 UV 가 안정이 되어서
water 로 안정이 될때까지 씻어주었구요
그리고 MeOH:water 1:1로 씻어주고 그다음 MeOH 로 씻어주었습니다.
첨부된 파일은 마지막단계인 MeOH로 씻을때 파장별 UV chromatogram 입니다
25%IPA와 water, MeOH:water(1:1) 로 wash 하였을때는 peak dml pattern 이
나타나면서 서서히 씻기는게 확인되었는데
MeOH 로 흘려줄때는 이런 pattern 이 나타나는지 알 수가 없어서 이렇게 글을 남깁니다.
답변 부탁드리겠습니다.
감사합니다^^
- HPLC
- 세척
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변 1
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답변
조윤환님의 답변
2010-08-17- 2
시글널을 확인 하셨다니 오염이 있었던 것은 확실할 겁니다. 하지만 검출기의 flow cell에 오염이 되면 시그널이 잘 잡히지 않습니다. 감도가 엄청 떨어지죠. 피크를 보기 힘든 상태가 되어 버립니다. 베이스라인이 거이 일자로 나오기도 합니다. 때문에 이런 경우엔 시스템 전체를 세척하기 보다는 flow cell만 따로 세척하는 것이 좋습니다. 가벼운 오염일 경우엔 주사기에 IPA 넣어 주입하는 방식으로 수차례 반복세척해주시면 되고요....좀 심각한 오염일 경우엔 flow cell의 렌즈 2개를 분해해서 IPA에 넣고 초음파 세척을 해주시면 됩니다. 제 생각엔 님의 경우엔 검출기 전단부에 오염이 있는 것 같습니다. 특히 MeOH로 씻을 때 피크가 계속 나타나고 있네요. 메탄올에 잘 녹는 물질이 나오고 있나봅니다. 제 생각엔 인젝션 루프쪽에 오염이 아닐까 싶습니다. 컬럼이 없으므로 알콜류로 세척하시고 다양한 유기용매(EA, THF, HEX 등)으로 세척해보세요. 좋아 질 겁니다.