2010-10-11
org.kosen.entty.User@28365d84
이승규(sklee0125)
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yeast K.lactis에서 단백질을 발현하고자 합니다.
섭씨 30도에 250rpm으로 하라고 나오던데
yeast 키울때는 rpm이 원래 이렇게 높은가요?
그 이유가 있습니까?
(E.coli를 키울 때는 150 rpm정도 사용합니다.)
기계 상의 이유로 180rpm 이상을 안쓰는데
150rpm 정도로 해도 발현에 지장이 없는지 궁금해서
여쭈어봅니다.
- yeast
- protein
- expression
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변 1
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답변
박윤희님의 답변
2010-10-20- 0
>yeast K.lactis에서 단백질을 발현하고자 합니다. > >섭씨 30도에 250rpm으로 하라고 나오던데 >yeast 키울때는 rpm이 원래 이렇게 높은가요? >그 이유가 있습니까? >(E.coli를 키울 때는 150 rpm정도 사용합니다.) > >기계 상의 이유로 180rpm 이상을 안쓰는데 >150rpm 정도로 해도 발현에 지장이 없는지 궁금해서 >여쭈어봅니다. rpm이 미생물의 생장에 중요한 요소이긴 하지만, 대개의 경우 단백질의 발현이라기 보다는 배지내 용존산소량의 차이로 인하여 나타나는 생장곡선의 변화에 따라 기인하는 것이라고 여겨집니다. 그러므로, 실험에서도 rpm을 조금 낮추었을 경우에는 생장이 조금 느려져서 배양 시간이 길어질 뿐이지 단백질의 발현에는 크게 영향을 주지 않으리라 여겨집니다. 저는 yeast 배양시에 cell의 특성에 따라 150-200rpm으로 적절히 조절하여 사용합니다.