2010-10-16
org.kosen.entty.User@ddfc3d4
전병훈(jbjbhjbh)
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저는 S2 cell을 이용하여 protein purification을 하고 있어요
purification work이 실험실에서 처음이라 모르는 것이 너무나 많네요 ㅜㅜ
현재 protein은 pMT/BiP/His vector에 cloning해서 sup으로 secretion되고요
700 uM cuso4로 induction 후 sup을 Ni-NTA column을 이용해서 purify하고 있습니다.
column내로 sup을 흘려주면 Ni-NTA bead 색깔이 갈색으로 변하는데 cuso4 때문이라고 예상 하고 있습니다. 200 mM imidazole을 이용해서 elution시 갈색 elute을 얻었고요
1. dialysis를 통해서 cu를 제거 할 수 있겠죠??
dialysis는 여러번 해줘도 상관 없을까요 (제 생각으론 elute 색이 투명해질때까지
dialysis를 해보려고 하는데요...단백질에 영향을 주진 않겠죠?
지금 하는 질문자체가 reasonable한지도 모르겟네요... 여러분의 도움이 필요합니다. 제가 잘못 생각하는 부분이 있다면 거침없이 이야기 해주세요
부탁드리겠습니다.^^
- protein purification
- cuso4
- dialysis
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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