2010-10-26
org.kosen.entty.User@59da89d0
임민주(golapa911)
- 1
cell-cell adhesion이 일어나는 곳에서 E-cadherin의 발현정도를 confocal로 보려고 하는데요.,,
poly-L-lysine으로 plate를 코팅시킨후 셀 깔고 3.7% paraformaldehyde로 fixation시켰는데요..
3.7% paraformaldehyde(in PBS)로 fixation시킨 후 cell 모양을 보면 셀 끼리 서로 붙어있던것이
셀 모양이 동글동글하게 변하면서 서로 떨어져있는것처럼 보입니다..(셀이 꼭 동그랗게 쪼그라드는것같습니다..)
셀끼리 붙어있는곳에서 E-cadherin의 발현을 보아야 되는데 각각 셀들이 쪼그라져서 떨어져있으니 환장할 노릇입니다..
fixation방법도 여러가지라 Ethanol을 이용해서 fixation시켜볼려고 하는데..
혹시 셀이 쪼그라드는 이유를 아시는지 방법은 없는지 가르쳐주세요~ㅠㅠ
- 3.7% paraformaldehyde
- fixation
지식의 출발은 질문, 모든 지식의 완성은 답변!
각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
답변 1
-
답변
박동현님의 답변
2010-10-26- 0
워낙 잘 떨어지는 세포인지 모르겠습니다만, 만약 fixation이 빨리 일어나지 못하면 일어날수 있는 현상이 아닐까 합니다. paraformaldehyde를 fresh 하게 만들어 쓰시는 것과, fixation을 혹시 37도에서 하셨으면, 온도를 낮춰보시는 것이 도움이 될 수 있습니다. Ethanol이나 methanol을 사용하는 방법은 antigen-antibody에 따라 결정하실 문제입니다. >cell-cell adhesion이 일어나는 곳에서 E-cadherin의 발현정도를 confocal로 보려고 하는데요.,, > >poly-L-lysine으로 plate를 코팅시킨후 셀 깔고 3.7% paraformaldehyde로 fixation시켰는데요.. > > 3.7% paraformaldehyde(in PBS)로 fixation시킨 후 cell 모양을 보면 셀 끼리 서로 붙어있던것이 > >셀 모양이 동글동글하게 변하면서 서로 떨어져있는것처럼 보입니다..(셀이 꼭 동그랗게 쪼그라드는것같습니다..) > >셀끼리 붙어있는곳에서 E-cadherin의 발현을 보아야 되는데 각각 셀들이 쪼그라져서 떨어져있으니 환장할 노릇입니다.. > >fixation방법도 여러가지라 Ethanol을 이용해서 fixation시켜볼려고 하는데.. > >혹시 셀이 쪼그라드는 이유를 아시는지 방법은 없는지 가르쳐주세요~ㅠㅠ