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>poly L lysine coat 에 fibronectin 과 laminin coating 을 하려고 합니다. > >fibronectin 과 laminin coating 단계가 무척 궁금합니다. ㅡㅡ; > >찾아봐도 coated with fibronectin, laminin 이라고만 나오고 > >coating 단계의 상세한 설명을 찾기가 힘듭니다. ㅠ.ㅠ > Culture Vessels and Surfaces 글쓴이 : 코람랩테크 날짜 : 08-10-21 09:34 조회 : 823 중략... 2. Surface coating and feeder cells 대부분 tissue culture work은 처분이 쉬운 polystyrene 용기를 사용하며, 표면은 hydrophilic (wettable)하게 될 수 있게 처리되어 있다. ATCC의 대부분의 cell line은 처리된 플라스틱 표면을 가진 dish나 flask 또는 roller bottle에서 키워진다. Tissue culture 플라스틱의 특성이 제조사마다 다양할 수 있기 때문에, 본 실험 전에 sample을 가지고 cell 성장과 번식에 적합한지를 평가해야 하겠다. 몇몇 까다로운 cell line은 그들이 부착하고 분화하기 위하여, 좀 더 많은 처리를 필요로 한다. 가장 일반적인 테크닉은 serum, collagen (ATCC #30-2511), laminin (ATCC #30-2505), gelatin, poly-L-lysine 또는 fibronectin으로 표면을 coating 하는 것이다. 간단한 부착 후, 몇몇 cell은 더 tissue-like 형태로 분화하기 위해 특별한 표면 처리를 필요로 한다. 예를 들면, extracellular matrix (ECM) protein (ATCC #30-2501, #30-2503)의 표면에서 culture시, endothelial cell은 tuble을 형성할 것이고, neuronal cell은 neurite process를 뻗어나갈 것이다. ECM protien은 tissue에서 cell 주위의 basal lamina membrane과 매우 비슷하며, 부착 지점을 제공 및 외부성장 요소와 hormone으로부터 signal transduction을 조절한다. 마지막으로, 낮은 농도로 seeding 된 몇몇 cell은 살아있는 cell의 support를 필요로 한다. 대부분의 cell은 cell이 가득 차 있을 때 편안함을 느낀다. Feeder layer cell은 metabolic leakage나 성장이나 다른 요소들의 active secretion을 통해 배지를 조성함으로써 crowd를 제공한다. 또한, cell 부착과 분화를 위한 support matrix도 제공한다. 표적 cell의 과성장으로부터 feeder layer cell을 보호하기 위해, 그들은 분화되지 않게 처리되어 진다. 일반적인 방법은 X-ray 또는 gamma ray로 irradiation 하거나 mitomycin C 처리가 있다. 이런 처리는 cellular DNA를 파괴하여 cell이 대사는 하지만 더 이상 분화하지는 않게 만든다. ATCC는 잘 정리된 다양한 feeder cell을 제공한다. 중략...