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무균시험법 배지에 대하여 궁금한게 있습니다.

2011-01-26 org.kosen.entty.User@21e5ec69 이재일(lji1928)
  • 1
제가 무균시헙법중 직접법을 하게되었습니다. 처음 접해보는 실험이라서 기초부터 모르는게 많습니다. 무균시험법에 배지에 대해 모르는게 있어서요. 3종류가 있는데 액상치오글리콜산 배지 I,액상치오글리콜산 배지 II, 대두카제인소화액체배지 이렇게 있는데 치오글리콜산은 세균용, 대두카제인은 진균용이라고 나왔는데 치오글리콜산 I, II의 차이가 한천이 조금 들어가는냐, 안들어가느냐의 차이가 있더라구요. 그래서 I의 같은 경우는 1L 기준 한천 0.75g이 들어가면 적은량이라 고체배지가 되진않을 것같아서 두개 배지의 차이를 알고 싶습니다. 또한 배지를 만들때 의문되는 문구가 있어서 이렇게 글을 남깁니다. I배지를 만들때 5번과 6번의 문구가 너무 어렵습니다. 5번은 "잘 섞어 배양" 이라는데 이건 잘 혼합해주라는 건가요?? 6번은 "배양이 끝난 다음의 엷은 적색부분이 위로부터 1/2 이하가 되도록 표면적과 깊이가 일정비를 갖는 적당한 시험용기에 필요한 양씩 나누어 담기" 라고 되어있습니다. 도대체 어떠한 용기인가요?? 이 시약은 한천이들어가지만 액체라서 50ml 팔콘 튜브에 넣어도 되는건가요?? 다음 과정이 7번 121도에서 15~20분간 고압증기멸균인데 팔콘 튜브는 형태가 망가질것 같아서. 어떤 용기를 말하는지 너무나 알고 싶습니다. 알려주시면 감사하겠습니다.
  • 무균시험법
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답변 1
  • 답변

    최기섭님의 답변

    2011-01-27
    • 0
    >제가 무균시헙법중 직접법을 하게되었습니다. 처음 접해보는 실험이라서 기초부터 모르는게 많습니다. 무균시험법에 배지에 대해 모르는게 있어서요. 3종류가 있는데 액상치오글리콜산 배지 I,액상치오글리콜산 배지 II, 대두카제인소화액체배지 이렇게 있는데 치오글리콜산은 세균용, 대두카제인은 진균용이라고 나왔는데 치오글리콜산 I, II의 차이가 한천이 조금 들어가는냐, 안들어가느냐의 차이가 있더라구요. 그래서 I의 같은 경우는 1L 기준 한천 0.75g이 들어가면 적은량이라 고체배지가 되진않을 것같아서 두개 배지의 차이를 알고 싶습니다. > >또한 배지를 만들때 의문되는 문구가 있어서 이렇게 글을 남깁니다. I배지를 만들때 5번과 6번의 문구가 너무 어렵습니다. >5번은 "잘 섞어 배양" 이라는데 이건 잘 혼합해주라는 건가요?? >6번은 "배양이 끝난 다음의 엷은 적색부분이 위로부터 1/2 이하가 되도록 표면적과 깊이가 일정비를 갖는 적당한 시험용기에 필요한 양씩 나누어 담기" 라고 되어있습니다. >도대체 어떠한 용기인가요?? 이 시약은 한천이들어가지만 액체라서 50ml 팔콘 튜브에 넣어도 되는건가요?? >다음 과정이 7번 121도에서 15~20분간 고압증기멸균인데 팔콘 튜브는 형태가 망가질것 같아서. 어떤 용기를 말하는지 너무나 알고 싶습니다. > >알려주시면 감사하겠습니다. 1. 5번의 잘섞어 배양은 혹시 "잘섞어서 멸균한다"가 아닌가요? FTM배지는 semi-solid agar여서, 호기성 세균부터 혐기성 세균까지 성장하는지 확인할 수 있습니다. agar표면에서 성장하면 호기성 균으로 볼 수 있구요. 혐기성세균일수록 tube 바닥에서 성장합니다. 2. 유리시험관에 면전이나 stopper(고무마개 같은 것)를 캡으로 사용합니다. 일반적으로 미생물을 배양하는 시험관에다가 잘 녹인 FTM 배지를 20 mL씩 분주해서 랙에 꽂은 후 멸균합니다. 멸균한 후에는 바로 식힙니다. FTM 배지는 산소에 반응하면 분홍색으로 변하게 됩니다. 멸균 후에는 투명한 노란색이었다가 공기와 만나는 부분에서 점점더 분홍색으로 변하게 되고, 상부에서 1/3이상이 분홍색으로 변하면 사용하지 말아야 합니다. 질문에 기술된 배지 조제방법은 잘 이해가 안가네요. 아래는 저희가 사용하는 방법입니다. 1) 1 L당 29.8 g을 증류수에 넣어 가열하면서 녹인다. 가열하면서 끓어 넘치면 안됨. 2) 완전히 녹으면 20 mL씩 screw tube에 넣는다. 3) 121도에서 15분간 멸균한다. 4) 멸균이 끝난 후 바로 배지를 식힌다. 5) 상온에서 보관한다. 6) 만약 배지 상부 1/3이상이 분홍색을 띄는 배지는 사용하지 않는다. 좋은 결과 있으시길 바랍니다.
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    >제가 무균시헙법중 직접법을 하게되었습니다. 처음 접해보는 실험이라서 기초부터 모르는게 많습니다. 무균시험법에 배지에 대해 모르는게 있어서요. 3종류가 있는데 액상치오글리콜산 배지 I,액상치오글리콜산 배지 II, 대두카제인소화액체배지 이렇게 있는데 치오글리콜산은 세균용, 대두카제인은 진균용이라고 나왔는데 치오글리콜산 I, II의 차이가 한천이 조금 들어가는냐, 안들어가느냐의 차이가 있더라구요. 그래서 I의 같은 경우는 1L 기준 한천 0.75g이 들어가면 적은량이라 고체배지가 되진않을 것같아서 두개 배지의 차이를 알고 싶습니다. > >또한 배지를 만들때 의문되는 문구가 있어서 이렇게 글을 남깁니다. I배지를 만들때 5번과 6번의 문구가 너무 어렵습니다. >5번은 "잘 섞어 배양" 이라는데 이건 잘 혼합해주라는 건가요?? >6번은 "배양이 끝난 다음의 엷은 적색부분이 위로부터 1/2 이하가 되도록 표면적과 깊이가 일정비를 갖는 적당한 시험용기에 필요한 양씩 나누어 담기" 라고 되어있습니다. >도대체 어떠한 용기인가요?? 이 시약은 한천이들어가지만 액체라서 50ml 팔콘 튜브에 넣어도 되는건가요?? >다음 과정이 7번 121도에서 15~20분간 고압증기멸균인데 팔콘 튜브는 형태가 망가질것 같아서. 어떤 용기를 말하는지 너무나 알고 싶습니다. > >알려주시면 감사하겠습니다. 1. 5번의 잘섞어 배양은 혹시 "잘섞어서 멸균한다"가 아닌가요? FTM배지는 semi-solid agar여서, 호기성 세균부터 혐기성 세균까지 성장하는지 확인할 수 있습니다. agar표면에서 성장하면 호기성 균으로 볼 수 있구요. 혐기성세균일수록 tube 바닥에서 성장합니다. 2. 유리시험관에 면전이나 stopper(고무마개 같은 것)를 캡으로 사용합니다. 일반적으로 미생물을 배양하는 시험관에다가 잘 녹인 FTM 배지를 20 mL씩 분주해서 랙에 꽂은 후 멸균합니다. 멸균한 후에는 바로 식힙니다. FTM 배지는 산소에 반응하면 분홍색으로 변하게 됩니다. 멸균 후에는 투명한 노란색이었다가 공기와 만나는 부분에서 점점더 분홍색으로 변하게 되고, 상부에서 1/3이상이 분홍색으로 변하면 사용하지 말아야 합니다. 질문에 기술된 배지 조제방법은 잘 이해가 안가네요. 아래는 저희가 사용하는 방법입니다. 1) 1 L당 29.8 g을 증류수에 넣어 가열하면서 녹인다. 가열하면서 끓어 넘치면 안됨. 2) 완전히 녹으면 20 mL씩 screw tube에 넣는다. 3) 121도에서 15분간 멸균한다. 4) 멸균이 끝난 후 바로 배지를 식힌다. 5) 상온에서 보관한다. 6) 만약 배지 상부 1/3이상이 분홍색을 띄는 배지는 사용하지 않는다. 좋은 결과 있으시길 바랍니다.
    이재일(lji1928) 2011-01-27

    감사합니다. 덕분에 많이 도움이 되서 지금 배지를 만들어 봅니다.*^^*. 감사합니다.

    이재일(lji1928) 2011-01-27

    감사합니다. 덕분에 많이 도움이 되서 지금 배지를 만들어 봅니다.*^^*. 감사합니다.

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