2011-02-10
org.kosen.entty.User@35b08277
박지훈(alwaysmile)
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C57/Bl6 mouse의 혈액에서 serum을 분리하여
AST, ALT level을 측정하고자 합니다
kit을 이용하여 colorimetric assay로 실험을 하려 하는데
메뉴얼에 정보가 잘 나오질 않네요..
제가 궁금한 건 전혈의 양이 최소 얼마정도면 측정이 가능할까요
가능하다면 쥐를 죽이지 않고 눈에서 혈액을 채취할 수 있으면 해서요..
실험 모델은 acetaminophen-induced liver injury 모델입니다.....
도움부탁드립니다.
- AST
- liver
- mouse
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답변 2
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답변
김기환님의 답변
2011-03-23- 0
이 질문이 올라온지 벌써 한달이 되어서 이미 문제를 해결하셨는지 모르겠네요 일반적으로 마우스의 총 혈액량은 60 mL/kg (or 6 - 8 mL/100g, or 6 - 8% of body weight)로 알려져 있습니다. 따라서 약 1-2mL정도인데요, 이때 총 volume 중 채혈가능한 최대량은 약 10-15% 입니다. 약 100 ~200 uL정도이지요. 최대 권고량이기 때문에 일반적인 안와채혈은 이 volume이내에서 이루어 집니다. AST, ALT 찍는 경우는 혈장을 써야 하므로, 채혈한 blood volume의 약 절반정도 혈장량을 가지고 찍게됩니다. 약 20uL의 혈장 sample을 얻기 위해서는 약 50 uL정도의 blood가 필요한거지요. kit의 민감도가 어느정도 양까지 (total quantity)잡아주는지 모르겠네요. 혈장 10 uL정도여도 찍을때는 보통 적당 비율로 희석해서 찍기 때문에, 혈장내 AST, ALT의 발현 농도등도 참고해야 하지 않을까 싶습니다. 저희의 경우 예전에 일반적으로 혈장 중 parameter를 볼때 blood는 최소 30~50 uL정도로 해서 혈장 10 ~ 30 uL정도 기준량 내에서 실험을 진행한 적은 있습니다. 실험 kit의 민감도, 희석 배수, 찍고자 하는 기질의 혈장내 예상 발현 농도 등을 factor로 하여 마우스에 무리가 없는 volume을 정하시는게 좋지 않을까 하네요 그럼 참고하시고 이미 실험이 진행되고 있을지 모르겠네요 좋은 결과 얻으시기 바랍니다 >C57/Bl6 mouse의 혈액에서 serum을 분리하여 >AST, ALT level을 측정하고자 합니다 > >kit을 이용하여 colorimetric assay로 실험을 하려 하는데 >메뉴얼에 정보가 잘 나오질 않네요.. > >제가 궁금한 건 전혈의 양이 최소 얼마정도면 측정이 가능할까요 > >가능하다면 쥐를 죽이지 않고 눈에서 혈액을 채취할 수 있으면 해서요.. > >실험 모델은 acetaminophen-induced liver injury 모델입니다..... > >도움부탁드립니다. -
답변
김기환님의 답변
2011-03-23- 0
첨부를 잊었네요 문헌 참고하세요^^ >C57/Bl6 mouse의 혈액에서 serum을 분리하여 >AST, ALT level을 측정하고자 합니다 > >kit을 이용하여 colorimetric assay로 실험을 하려 하는데 >메뉴얼에 정보가 잘 나오질 않네요.. > >제가 궁금한 건 전혈의 양이 최소 얼마정도면 측정이 가능할까요 > >가능하다면 쥐를 죽이지 않고 눈에서 혈액을 채취할 수 있으면 해서요.. > >실험 모델은 acetaminophen-induced liver injury 모델입니다..... > >도움부탁드립니다.
박지훈(alwaysmile) 2011-03-23친절한 답변 감사합니다^^ 올려놓고 잊고 있다가 답글이 올라왔단 메일 받고 들어와봤더니 좋은 답변이 있네요^^ 다시 한번 감사드립니다
박지훈(alwaysmile) 2011-03-23친절한 답변 감사합니다^^ 올려놓고 잊고 있다가 답글이 올라왔단 메일 받고 들어와봤더니 좋은 답변이 있네요^^ 다시 한번 감사드립니다