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>NO assay 결과를 해석하려고 하려고 합니다. >미생물에서 회수한 토탈 단백질을 추출한 후 투석을 거쳐 단백질 농도를 맞추어 raw cell 배양액에 처리를 하였습니다. 그결과 동일하고 배양조건만 다른 미생물 단백질 추출물이 결과가 다르게 나왔습니다. >LPS를 처리한 그룹은 미세한 차이를 보였지만, LPS를 처리하지 않고 단독으로 처리한 단백질 추물 A,B가 NO의 량이 많이 차이가 납니다. >만일 A>B인 NO 발현량을 어떻게 해석을 하면 되나요? > >1) phagocytosis의 활성을 증가 시켰으므로 A가 B 보다 좋은 면역활성을 갖는 것인가요? > >2) A가 Inflammation 에 반응의 촉매제로써 염증과 관련된 질병에 대해서 별다른 효능을 기대할수 없다고 해석해야 하나요? > >꼭 답변 부탁드리겠습니다 > phagocytosis만의 활성도를 보실려고 하신건가요? 아님 정상 세포에 염증을 유발시킨후 NO formation 을 억제시킨 결과를 보시는 건가요? 자료가 더 있었으면 더 좋았을텐데요.. LPS (-), (+)의 control 대비 분석을 하시면 될 것같은데 질문 내용만으로는 결론을 내기가 힘듭니다. salay@daum.net 으로 첨부자료를 보내주신다면 도움을 드릴 수 있는 부분이 있으면 도와드리겠습니다.^^

1. "LPS 처리군에서는 미세한 차이가 나왔지만 A, B 단독군의 처리간에는 차이가 많이 발생했다"에서 LPS 처리군은: LPS+A, LPS+B를 의미하는 것인가요? 만약 그런 경우라면, 워낙 LPS가 강력한 activator이기 때문에 LPS의 작용에 의해서 A,B간에 차이가 있더라고 그 활성이 LPS작용 대비 묻혀 보일 가능성이 있을 듯 하네요. 2. 그렇다면 A,B의 활성 차이는 단독군의 결과로 판단하는게 맞는것 같은데요.. 이때 check up 한가지, 각 A, B의 NO level은 LPS에 비하여 어떠한가요? A가 LPS 대비 굳이 더 높지 않더라도 충분히 상승되어 있으면 정도에 따라 의미있는 level로 판단 할 수 있겠으나, A가 B보다 높다고 하더라도 A의 양이 LPS 대비 상당 히 적은 정도이면 A와 B가 차이가 난다고 하더라도 큰 의미에서는 "면역활성이 좋 다"고 하기에는 무리가 아닐수도 있을 듯 합니다. 이때 LPS와의 비교정도가 불분명하 므로 그 criteria를 정하기는 힘들것입니다. 때문에 phagocytosis와 병행하여 보는 것일텐데 'phagocytic effect가 있다'고 하는 점도 구체적인 fact 대비하여 고려할 필요가 있을 듯 합니다. 3. NO production만으로 '면역활성이 좋다'는 의미로 가야하는지 거꾸로 '염증에 안좋 다'고 가야하는지에 대한 signal에 대한 해석에는 좀 광의가 있을 듯 하여, 연관된 다 른 phenotype과 signaling factor들이 함께 참고가 되면 좋을 듯 합니다. 여기서는 cell functional assay로 phagocytosis를 보신다고 하였고, phagocytosis는 innate immunity에서 host defense system으로 중요한 역할을 하기 때문에 일단은 "면역활성측면"에서 보는 쪽이 좋을 듯 합니다. immune activator들이 임상적으로 염증상에서 사용하지는 않는다는 것은 잘 알고 계 실줄 압니다. 그럼 참고하세요 >NO assay 결과를 해석하려고 하려고 합니다. >미생물에서 회수한 토탈 단백질을 추출한 후 투석을 거쳐 단백질 농도를 맞추어 raw cell 배양액에 처리를 하였습니다. 그결과 동일하고 배양조건만 다른 미생물 단백질 추출물이 결과가 다르게 나왔습니다. >LPS를 처리한 그룹은 미세한 차이를 보였지만, LPS를 처리하지 않고 단독으로 처리한 단백질 추물 A,B가 NO의 량이 많이 차이가 납니다. >만일 A>B인 NO 발현량을 어떻게 해석을 하면 되나요? > >1) phagocytosis의 활성을 증가 시켰으므로 A가 B 보다 좋은 면역활성을 갖는 것인가요? > >2) A가 Inflammation 에 반응의 촉매제로써 염증과 관련된 질병에 대해서 별다른 효능을 기대할수 없다고 해석해야 하나요? > >꼭 답변 부탁드리겠습니다 >

>NO assay 결과를 해석하려고 하려고 합니다. >미생물에서 회수한 토탈 단백질을 추출한 후 투석을 거쳐 단백질 농도를 맞추어 raw cell 배양액에 처리를 하였습니다. 그결과 동일하고 배양조건만 다른 미생물 단백질 추출물이 결과가 다르게 나왔습니다. >LPS를 처리한 그룹은 미세한 차이를 보였지만, LPS를 처리하지 않고 단독으로 처리한 단백질 추물 A,B가 NO의 량이 많이 차이가 납니다. >만일 A>B인 NO 발현량을 어떻게 해석을 하면 되나요? > >1) phagocytosis의 활성을 증가 시켰으므로 A가 B 보다 좋은 면역활성을 갖는 것인가요? > >2) A가 Inflammation 에 반응의 촉매제로써 염증과 관련된 질병에 대해서 별다른 효능을 기대할수 없다고 해석해야 하나요? > >꼭 답변 부탁드리겠습니다 >원래 NO촉진제인 LPS에 의해 iNOS가 증가로 생성되는 NO량을 측정하게 되는데 아마도 상기 이유는 NO으 ㅣ자연적을 발색이나 false positive인 듯 함 일르 제거하기 위해 SNP를 대조로 확인하여 표준곡선을 작성후 ㅅ;료에 대한 validation하기바람