2011-05-20
org.kosen.entty.User@2dfcff43
장현희(petfrog)
- 5
human serum으로 gene study를 하려고 하는데요..
이런 실험도 시행하고 있는지 해서요..
ELISA 기법으로 이용하여 하는 것인가요??
cell내에서의 pcr 정도의 실험만 해보아서요..
용량은 얼마나 필요하나요??
- human serum
- gene
- ELISA
지식의 출발은 질문, 모든 지식의 완성은 답변!
각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
답변 5
-
답변
김현선님의 답변
2011-05-20- 2
serum을 이용한 gene work 하시려면 ELISA 방법은 비효율적일 것 같습니다. serum을 샘플로 이용하여 DNA work을 많이 하고 있습니다. 최근 circulating DNA와 같은 것을 target으로 하여 연구가 진행되고 있습니다. 그런 자료들을 보시면 어떤 방법으로 연구가 되고 있는지 확인하실 수 있습니다. serum을 이용한 연구를 하시려면 DNA 추출이 용이하지 않기 때문에 많은 어려움이 있습니다. 일단 DNA 추출 방법부터 셋업하셔야 합니다. >human serum으로 gene study를 하려고 하는데요.. >이런 실험도 시행하고 있는지 해서요.. >ELISA 기법으로 이용하여 하는 것인가요?? >cell내에서의 pcr 정도의 실험만 해보아서요.. >용량은 얼마나 필요하나요?? -
답변
김상태님의 답변
2011-05-23- 0
>human serum으로 gene study를 하려고 하는데요.. >이런 실험도 시행하고 있는지 해서요.. >ELISA 기법으로 이용하여 하는 것인가요?? >cell내에서의 pcr 정도의 실험만 해보아서요.. >용량은 얼마나 필요하나요?? -우선 serum을 제거한 배지를 세포에 처리한것과 serum을 첨가한 세포를 모아서 세포의 세포주기와 TOTAL RNA를 분리하여 MICROARRAY를 통해 발현분석을 수행하면 됨 일부를 REAL TIME PCR을 수행하면 정량내지 특이 유전자발현을 확인가능함 -
답변
김상태님의 답변
2011-05-23- 0
>human serum으로 gene study를 하려고 하는데요.. >이런 실험도 시행하고 있는지 해서요.. >ELISA 기법으로 이용하여 하는 것인가요?? >cell내에서의 pcr 정도의 실험만 해보아서요.. >용량은 얼마나 필요하나요?? 용량은 100-500ng이상이면 충분히 PCR이 가능하고 REAL TIME PCR은 RNA양을 충분히 확보하여 Cdna를 수행후 PCR를 수행하면 좋을듯합니다 -
답변
이상후님의 답변
2011-05-23- 0
>human serum으로 gene study를 하려고 하는데요.. >이런 실험도 시행하고 있는지 해서요.. >ELISA 기법으로 이용하여 하는 것인가요?? >cell내에서의 pcr 정도의 실험만 해보아서요.. >용량은 얼마나 필요하나요?? 가능합니다. Serum에서 DNA를 추출하여 high-throughput genotyping을 할 수가 있습니다. 자세한 추출법은 Urology, 71(5), 967-970(2008) 또는 Nucleic Acids Res. 1991, 19(20): 5792(1991)을 참고해 보시면 이해하기 쉬울 것으로 생각됩니다. 또한 serum에서 circulating free DNA를 추출해서 genotyping을 하는 것도 가능합니다.(J.Clin. Invest. 56, 512-515(1975).) 추출에는 100ul의 serum 만 있어도 가능합니다.(Nucleic Acids Res. 1991, 19(20): 5792(1991)). 참고로 이 논문을 첨부하니 참고하세요.. -
답변
김상태님의 답변
2011-06-14- 0
>human serum으로 gene study를 하려고 하는데요.. >이런 실험도 시행하고 있는지 해서요.. >ELISA 기법으로 이용하여 하는 것인가요?? >cell내에서의 pcr 정도의 실험만 해보아서요.. >용량은 얼마나 필요하나요?? 세포증식상 필요한 성장인자가 함유하여 유전자발현을 유도함 이런경우 microarray이나 Q-PCRㄹ르 수행하여 유전자분석 수행함