2011-06-09
org.kosen.entty.User@2f72df37
김민혁(conan202)
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endotoxin을 제거할 수 있는 방법에 대해 알고 싶습니다.
유기물 합성 후 workup 과정에서 층분리 시 수층으로 빠져나가지 않을까요?
혹은 Distilation 과정 중 제거 가능한가요?
아니면 3차 정제수를 Workup 용매로 사용해야 하나요?
알려주시면 감사하겠습니다.
좋은하루 되세요
- 유기합성
- 제거
- endotoxin
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변 3
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답변
이상후님의 답변
2011-06-09- 0
>endotoxin을 제거할 수 있는 방법에 대해 알고 싶습니다. > >유기물 합성 후 workup 과정에서 층분리 시 수층으로 빠져나가지 않을까요? > >혹은 Distilation 과정 중 제거 가능한가요? > >아니면 3차 정제수를 Workup 용매로 사용해야 하나요? > >알려주시면 감사하겠습니다. > >좋은하루 되세요 유기합성과정에서 엔도톡신을 고려하신 이유가 궁금하군요.. 혹시 질문자분께서 엔도톡신을 거론하신 이유가 생물학적 소재에 유기합성으로 modification이나 다른 간단한 반응을 하신 건지요?..아니면 유기합성시에 사용한 다른 toxic한 chemicals때문인지요?.. 보통 엔도톡신은 세균 특히 그람음성균에 있는 특정 물질로서 lipopolysaccharide(LPS)를 지칭하는데, 만약 LPS라면 workup과정에서 물층으로 완전히 가지는 않을 것입니다. LPS자체가 수용성과 지용성의 중간성격을 가지고 있습니다. 제거하기 가장 확실한 방법은 column chromatography(Sephadex 나 Sephacryl계통의 resin 충진된)로 분리하는 방법입니다. -
답변
조윤환님의 답변
2011-06-09- 0
endotoxin의 정의에 대해서는 앞서 답변 주셨습니다만.... LSP는 엔도톡신 검사를 할 때 사용하는 엔도톡신 표준물질일 뿐입니다. 엔도톡신은 의약품 중 주사제의 경우 필수 점검항목이죠. 보통은 LAL test를 통해 확인합니다. LAL test시 사용하는 엔도톡신 표준물질이 바로 LSP입니다. 발열성 물질이라고도 하는 엔도톡신은 미생물 오염에 기인합니다. 미생물이 죽으면서 세포벽이 파괴되고.... 그 과정에서 엔도톡신이 방출되기 때문에 멸균과정을 행하였다해도 엔도톡신이 남을 수 있기 때문에 검사를 행하는 것입니다. 자연상태의 엔도톡신은 지질, 탄수화물, 단백질로 구성되어 있으며 자연상태에서 대단히 안정하고 열에 강하며 음전하를 띄며 분자량이 큰 것이 특징입니다. (1,000,000 dalton 이상) 유기물 합성 과정에서 미생물 오염이 있다면 엔도톡신이 발견될 수 있습니다. 오염원도 시약, 용매, 반응기구, 실험자의 신체 등 다양하기 때문에 무균 상태에서 모든 조작을 해야만 엔도톡신에서 자유로워질 수 있습니다. 단순히 aq. work-up을 한다던가 3차 정제수를 Workup 용매로 사용하는 등으로만은 피하기 어렵습니다. 보통 엔도톡신 제거방법으로 0.2um 멤브레인 필터법을 사용하는데... 이는 여과를 통해 엔도톡신을 제거하는 것이 아니라 엔도톡신의 원인물질인 미생물을 제거하는 것으로 이해하셔야 합니다. 따라서 시료가 이미 엔도톡신에 오염되어 있다면 여과를 해도 완전히 제거하기는 어려운거죠. 하지만 효과는 꽤 좋습니다. 문제는 여과를 하더라도 여과된 용액을 무균환경에서 다뤄야 하므로 시설이 갖추어져 있지 않다면 실행하기 어렵습니다. 물에 녹는 물질이라면 0.2um 멤브레인 여과 후 동결건조를 하면 쉽게 결정을 얻을 수 있겠으나, 유기 용매를 사용해야하는 경우라면 좀더 상황이 복잡해지겠군요. 참고하세요. -
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김상태님의 답변
2011-06-14- 0
>endotoxin을 제거할 수 있는 방법에 대해 알고 싶습니다. > >유기물 합성 후 workup 과정에서 층분리 시 수층으로 빠져나가지 않을까요? > >혹은 Distilation 과정 중 제거 가능한가요? > >아니면 3차 정제수를 Workup 용매로 사용해야 하나요? > >알려주시면 감사하겠습니다. >엔도톡신은 분자량에 의해 거의 제거하기는 어려우나 밀리포어사와 전하가 엔도톡신과 상호작용하는 컬럼을 사용하면 될듯 >좋은하루 되세요