2011-06-15
org.kosen.entty.User@17a580ee
임종혁(chulbrain)
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흡착제를 이용해서 엔도톡신 제거시 NaCl을 첨가하게 되어있는데
NaCl을 첨가하는 정확한 이유가 어떻게 되나요?
과학적 mechanism에 대해 알려주십시오.
아니면 관련 문서가 있다면 소개 부탁합니다.
- 엔도톡신
- 흡착제
- NaCl
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변 2
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답변
장성재님의 답변
2011-06-15- 0
엔도톡신을 제거하기 위해서는 일반적으로 ion exchange gel 또는 membrane을 이용합니다. 이때 효율적으로 엔도톡신을 제거하기 위한 인자로써는 pH 및 salt conc.를 들 수 있습니다. 따라서, LPS 등의 엔도톡신만을 효율적으로 제거하는 buffer의 조성이 중요합니다. 이 때문에 NaCl이 일정 농도로 포함되어야만 합니다. >흡착제를 이용해서 엔도톡신 제거시 NaCl을 첨가하게 되어있는데 > >NaCl을 첨가하는 정확한 이유가 어떻게 되나요? > >과학적 mechanism에 대해 알려주십시오. > >아니면 관련 문서가 있다면 소개 부탁합니다. -
답변
이상후님의 답변
2011-06-16- 0
>흡착제를 이용해서 엔도톡신 제거시 NaCl을 첨가하게 되어있는데 > >NaCl을 첨가하는 정확한 이유가 어떻게 되나요? > >과학적 mechanism에 대해 알려주십시오. > >아니면 관련 문서가 있다면 소개 부탁합니다. 흡착제로 많이 사용되는 것으로 이온교환수지나 polymyxin B가 있는데, 보통 분리하고자 하는 시료의 등전점이 엔도톡신과 어느정도 차이가 나게 되면 이온교환 수지를 사용하게 되는데 이때 염 용액으로 NaCl이 사용됩니다. 원리는 이온들의 경쟁원리를 이용하여 등전점보다 낮거나 높은 pH의 이동상으로 흘려주게 되면 시간 차이로 샘플을 분리시킬 수 있습니다. 이때 NaCl은 이온경쟁을 통해 흡착된 시료를 탈착시키수가 있습니다. 이온교환 수지 원리는 이 지면상에서 자세하게 설명하기는 어려우니 검색엔진에서 쉽게 이온교환수지 원리를 검색해 보시면 보다 더 자세히 알 수 있을 것입니다. 흡착제로 polymyxin B는 LPS같은 엔도톡신의 lipid A 부분과 강하게 흡착하는 특징이 있습니다. polymyxin B는 항생제로서 실제로 흡착에 사용할 때는 Sepharose같은 분리용 레진에 고정화 시켜서 분리하고 있습니다. 그런데 시료와 엔도톡신의 등전점이 비슷하거나 같을 때 polymyxin B를 주로 사용하는데 시료가 단백질의 경우에는 특히 효과가 있습니다. 그런데 종종 단백질에 따라서 polymyxin B에 흡착되는 단백질이 있는데 이럴 경우 NaCl을 소량 첨가해 주면 마찬가지로 이온경쟁의 원리로 인하여 흡착되는 단백질을 감소시켜주는 효과가 있습니다.