- 1
- 폐렴
- 배양
- 계대
각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
-
답변
유용규님의 답변
2011-07-08- 2
저도 비슷한 경험이 있었는데.. agar배지에서 키울경우에는 유지가 되더군요.... 혹시 액상배지에서 계대배양을 반복하신건가요?
agar 배지에서 배양을 해보시는 건 어떠실까요....
참고하시라고... Klebsiella medium 알려드리겠습니다.
composition per 1041.0ml
Agar 15g
adonitol 4g
2xSalt solution 500ml
Uric acid solution 200ml
Phenol Red solution 10ml
Sodium taurocholate solution 30ml
Carbenicillin solution 1ml
2xSalt solution
KCl 8g
K2HPO4 3g
NaCl 2g
KH2PO4 1g
MgSO4*7H2O 0.2g
Add components to distilled/dionized water and bring volumne to 1.0L. Mix thoroughly
Uric acid solution
Uric acid 3g
Dissolve uric acid in a small volume of 1N NaOH. Bring voume to 200ml with distilled/deionized water. Adjust pH to 7.1 with 1N HCl. Filter sterilize
Phenol Red solution(10ml volume)
Phenol red 1g
Add phenol red to sterile distilled/deionized water and bring volume to 10.0ml. Mix thoroughly
Sodium taurocholated Solution(30ml volume)
Sodium taurocholate 0.4g
Add sodium taurocholate to sterile distilled/deionized water and bring volume to 30ml. Mix thoroughly
Carbenicillin solution(1ml volume)
Carbenicillin 5mg
Add carbenicillin to distilled/deionized water and bring volume to 1ml. Mix thoroughly. filter sterilize
add adonitol and agar to 500ml of 2xsalt solution. bring volume to 800ml with distilled/deionized water. Mix thoroughly. gently heat and bring to boiling. Autoclave for 15min at 15 psi pressure-121'C. Cool to 45'C-50'C. Aseptically add 200ml of uric acid solution, 30ml of sodium taurocholate solution, 10ml of Phenol red solution, and 1ml of carbenicillin solution. Mix thoroughly. Pour into sterile Petri dishes or distribute into sterile tubes
-------------------------------------질문-------------------------------------
폐렴간균 (klebsiella pneumoniae) 배양에 관하여 질문 드립니다 실험실내 폐렴간균을 NB를 이용하여 계대 배양하여 사용하는데 자꾸만 실험에 실패하네요;; 배양해도 균수가 3회 계대 배양이후 2~3일만 지나도 급속도로 줄어들어 실험에서 사용 불가하게 되고 결국 배지만 버리게 되네요 원래 폐렴간균의 사멸시간이 빠른건가요??? 도움 부탁드립니다