지식나눔

p-p38, p-pJNK western sample prep!

제가  western 경험이 많지가 않아서요..

 

이들 phosphorylated form을 western 하려면 sample prep 할때 방법이 일반 western을 할때와 다른가요..?

 

실험전에 논문들을 찾아보고 있는데, immunoprecipitation을 western 하기전에 한 논문도 있고, 또한 nuclear-cytosol extraction kit 를 사용해서 sample을 준비한 다음 western을 한 논문도 있고, 그냥 일반 western 하는 방법으로 해서 본 논문도 있고..

 

저희가 사용하는  sample 은 mouse brain tissue 입니다.

 

조언부탁드립니다, 감사합니다.

  • western
  • p-p38
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답변 1
  • 답변

    김제현님의 답변

     

    -------------------------------------질문-------------------------------------

    제가  western 경험이 많지가 않아서요..

     

    이들 phosphorylated form을 western 하려면 sample prep 할때 방법이 일반 western을 할때와 다른가요..?

     

    실험전에 논문들을 찾아보고 있는데, immunoprecipitation을 western 하기전에 한 논문도 있고, 또한 nuclear-cytosol extraction kit 를 사용해서 sample을 준비한 다음 western을 한 논문도 있고, 그냥 일반 western 하는 방법으로 해서 본 논문도 있고..

     

    저희가 사용하는  sample 은 mouse brain tissue 입니다.

     

    조언부탁드립니다, 감사합니다.

     

     

     

    무엇보다도 RIPA buffer를 확인 하세요.

    NaF, NaVO3 등등이 들어 갈겁니다.

    혹은 PPi cocktail를 쓰기도 합니다.

    PPi cocktail ( NaPPi, NaV3O4, NaF, Na2MoO4).

     

     

     

     

    -------------------------------------질문-------------------------------------

    제가  western 경험이 많지가 않아서요..

     

    이들 phosphorylated form을 western 하려면 sample prep 할때 방법이 일반 western을 할때와 다른가요..?

     

    실험전에 논문들을 찾아보고 있는데, immunoprecipitation을 western 하기전에 한 논문도 있고, 또한 nuclear-cytosol extraction kit 를 사용해서 sample을 준비한 다음 western을 한 논문도 있고, 그냥 일반 western 하는 방법으로 해서 본 논문도 있고..

     

    저희가 사용하는  sample 은 mouse brain tissue 입니다.

     

    조언부탁드립니다, 감사합니다.

     

     

     

    무엇보다도 RIPA buffer를 확인 하세요.

    NaF, NaVO3 등등이 들어 갈겁니다.

    혹은 PPi cocktail를 쓰기도 합니다.

    PPi cocktail ( NaPPi, NaV3O4, NaF, Na2MoO4).

     

     

     

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