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-------------------------------------질문-------------------------------------

EGCG 와 PHMB를 가지고 항균실험을 진행했습니다.

방법은 96 well에서 두 시약을 섞어서 MIC를 파악했습니다.

농도비례하여 균의 증식이 억제되는 것을 볼 수 있었습니다.

그런데 그 농도에서 얼마정도의 살균을 보이는지 log값을 보려고 합니다.

agarplate에 spreading해서 대조군에 비해 균이 얼마나 자라지 않았는가를 보고 log값을 취하는 것으로 알고 있습니다.

그런데 자세한 실험 프로토콜을 찾아 봤는데 찾기가 어렵고 부분적으로만 나와 있어서 문의 드립니다.

log 값을 보려는 agar plate 실험에서

얼만큼의 균을 접종해야 하는지 cfu/ml?

균과 시약을 함께 접종하고 몇시간을 incubation해야 하는지?

프로토콜을 알려 주시면 감사하겠습니다.

 -위 약물에 대한 적정농도계산은 최소농도 몇 ng---mg사이를  농도로 간격을 두고 희석하여

세포가 50%정도 죽는 농도인 IC50값을 선정하는 것이 룰입니다 그리고 살균이란 말보다 세포사멸정도를 용어상 택일하시죠 그리고 농도가 최소일수록 좋은 물질입니다

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EGCG 와 PHMB를 가지고 항균실험을 진행했습니다.

방법은 96 well에서 두 시약을 섞어서 MIC를 파악했습니다.

농도비례하여 균의 증식이 억제되는 것을 볼 수 있었습니다.

그런데 그 농도에서 얼마정도의 살균을 보이는지 log값을 보려고 합니다.

agarplate에 spreading해서 대조군에 비해 균이 얼마나 자라지 않았는가를 보고 log값을 취하는 것으로 알고 있습니다.

그런데 자세한 실험 프로토콜을 찾아 봤는데 찾기가 어렵고 부분적으로만 나와 있어서 문의 드립니다.

log 값을 보려는 agar plate 실험에서

얼만큼의 균을 접종해야 하는지 cfu/ml?

균과 시약을 함께 접종하고 몇시간을 incubation해야 하는지?

프로토콜을 알려 주시면 감사하겠습니다.

대략 5x10^5 viable cells/ml이 되도록 접종하는 걸로 알려져 있습니다.

배양시간은 보통 37'C에서 18시간 정도입니다.

 CFU/ml
= Counts * Dilution factor
= Counts * (1/ml on plate) * (ml wash medium/ml exposure solution) * 10^#dilution tube
= Counts * (1/0.5) * (10/0.4) * 10^#dilution tube
= Counts * 2 * 25 * 10^#dilution tube

항균물질의 효과성 측정은 대조시료와 실 시료사이의 log reduction을 다음과 같이 계산하면 됩니다. Log Reduction = Log Control (CFU/ml) ? Log Test Sample (CFU/ml)

참고로 대조 시료의 고유 항균효과의 측정은 viability counts와 대조 시료사이의 log reduction을 다음과 같이 계산하면 됩니다.

Log Reduction = Log Viability (CFU/ml) ? Log Control Sample (CFU/ml)