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HPLC에 어떤 표준물질을 써야할지 모르겠습니다.
이동상과 HPLC는
다음과 같습니다.
반응계는 모두 물이고
시료는 HPLC피크상 모두 13분 이전에 측정됩니다.
또한 반응의 온도는 50도이구요
따라서 물에 잘녹고
적어도 15분뒤에 검출이되면서
50도에서 분해가 일어나지 않는
표준물질을 알수있을까요.
- HPLC
- Standard
각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변
조윤환님의 답변
2011-09-26- 0
정량을 하기 위해 표준물질이 필요하신 거라면 정량하고자하는 물질과 동일한 물질이면 됩니다. 단, 함량(순도)을 정확히 알고 있어야 합니다.
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HPLC에 어떤 표준물질을 써야할지 모르겠습니다.
이동상과 HPLC는
다음과 같습니다.
반응계는 모두 물이고
시료는 HPLC피크상 모두 13분 이전에 측정됩니다.
또한 반응의 온도는 50도이구요
따라서 물에 잘녹고
적어도 15분뒤에 검출이되면서
50도에서 분해가 일어나지 않는
표준물질을 알수있을까요.
조윤환(brmdolee) 2011-09-27물질마다 검출기에 대한 peak response가 다르기 때문에 검출하고자하는 물질과 동일하면서 함량을 정확히 아는 물질로 calibration curve를 구해서 정량해야 합니다. 정량하고자하는 물질과 다른 표준물질을 쓸 경우에는 각 분석물질 대비 표준품에 대한 response factor를 구해야겠죠.
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답변
이상후님의 답변
2011-09-27- 0
-------------------------------------질문-------------------------------------
HPLC에 어떤 표준물질을 써야할지 모르겠습니다.
이동상과 HPLC는
다음과 같습니다.
반응계는 모두 물이고
시료는 HPLC피크상 모두 13분 이전에 측정됩니다.
또한 반응의 온도는 50도이구요
따라서 물에 잘녹고
적어도 15분뒤에 검출이되면서
50도에서 분해가 일어나지 않는
표준물질을 알수있을까요.
질문자께서 분석하고자 하는 물질은 하나 이상인거 같군요..
우선 HPLC에서 측정하고자 하는 물질의 정보를 언급해 주셔야 standard를 추천해 줄 수 있습니다. 물론 측정하고자 하는 물질이 기존에 commercial하게 구할 수 없을 수도 있습니다. 이럴 경우에는 측정물질과 구조적으로 유사한 물질을 찾아서 그걸 사용하면 됩니다. 측정하고자 하는 물질을 쉽게 구할 수 있다면 그걸 standard로 해서 calibration curve를 구한후에, 실제 샘플을 분석했을 때 얻어지는 area를 y 값에 대입하게 되면 원하는 농도를 구할 수 있습니다. 이때 좀 더 정확하게 정량을 하려면 standard와 물리,화학적으로 유사한 구조를 갖으면서 standard와 RT가 거의 차이 나지 않는 제3의 물질을 internal standard(IS)로 사용하면 즉, calibration curve 구할 때도 standard/IS로 계산한 값을 point별로 놓고 직선의 방정식을 구하면 되고, 실제 샘플 분석시에도 실제샘플/IS의 형태로 정량하게 되면 좀 더 정확하게 정량할 수 있습니다. 물론 IS를 사용하는 것은 선택입니다. 일반적으로 단순 실험용일 경우라면 IS를 사용하는 경우는 거의 없습니다. 참고하세요..
제가 이해가 잘 안가서 그러는데요.
동일한 물질을 사용하면 같은 RT에서 Peak가 나오는데 어떻게 정량을 하는거에요?
그리고 저는 표준물질과 정량하고자 하는 물질의
RT차이와 비율을 이용해서 정량하고 있거든요