지식나눔

알부민(human serum albumin)질문드립니다.

제가 알부민(human serum albumin)과 약물을 PBS용액에서 결합 시킨 후 PBS를 제거하여
알부민 약물 결합체를 얻고자하는데요.
제 생각에 동결건조를 이용할 경우 PBS성분이 남을 것 같아서
투과막을 이용 PBS를 물로 바꾼 다음 동결건조를 시키고자 하는데요.
PBS를 물로 바꿔어도 알부민에 문제가 생기지 않을까 질문드립니다.
많은 실험 고수님들의 답변 부탁드립니다

  • albumin
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답변 2
  • 답변

    황인성님의 답변

    알부민에 문제가 생기는지는 물에 넣고 구조를 살펴본 사례가 드물어 직답은 어렵지만, 적어도 이론적으로는 버퍼에 존재하는 형태를 그대로 유지하기 힘들다고 보입니다. 설사 구조가 유지된다 해도 이것과 결합한 약물이 떨어질 가능성이 90% 이상입니다. 단백질과 결합하는 물질은 대부분 hydrophobicity나 charge를 이용해 결합하는데 주변의 hydrophobicity나 charge가 바뀌면 결합 정도도 바뀌기 때문입니다. 운 좋게 떨어지지 않는다 해도 물에서만 유지되는 알부민 구조에, 물에서만 붙는 가짜 약물(false positive)일 가능성이 높습니다. 

    -------------------------------------질문-------------------------------------

    제가 알부민(human serum albumin)과 약물을 PBS용액에서 결합 시킨 후 PBS를 제거하여
    알부민 약물 결합체를 얻고자하는데요.
    제 생각에 동결건조를 이용할 경우 PBS성분이 남을 것 같아서
    투과막을 이용 PBS를 물로 바꾼 다음 동결건조를 시키고자 하는데요.
    PBS를 물로 바꿔어도 알부민에 문제가 생기지 않을까 질문드립니다.
    많은 실험 고수님들의 답변 부탁드립니다

    알부민에 문제가 생기는지는 물에 넣고 구조를 살펴본 사례가 드물어 직답은 어렵지만, 적어도 이론적으로는 버퍼에 존재하는 형태를 그대로 유지하기 힘들다고 보입니다. 설사 구조가 유지된다 해도 이것과 결합한 약물이 떨어질 가능성이 90% 이상입니다. 단백질과 결합하는 물질은 대부분 hydrophobicity나 charge를 이용해 결합하는데 주변의 hydrophobicity나 charge가 바뀌면 결합 정도도 바뀌기 때문입니다. 운 좋게 떨어지지 않는다 해도 물에서만 유지되는 알부민 구조에, 물에서만 붙는 가짜 약물(false positive)일 가능성이 높습니다. 

    -------------------------------------질문-------------------------------------

    제가 알부민(human serum albumin)과 약물을 PBS용액에서 결합 시킨 후 PBS를 제거하여
    알부민 약물 결합체를 얻고자하는데요.
    제 생각에 동결건조를 이용할 경우 PBS성분이 남을 것 같아서
    투과막을 이용 PBS를 물로 바꾼 다음 동결건조를 시키고자 하는데요.
    PBS를 물로 바꿔어도 알부민에 문제가 생기지 않을까 질문드립니다.
    많은 실험 고수님들의 답변 부탁드립니다

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  • 답변

    김재훈님의 답변

    관련 회원분의 답변을 전달해 드립니다.

    What is 코너 담당 김재훈 드림.

    ----------------

     

     

    알무민의 용해시간 / 알부민과 약물의 결합반응시간을 최소화해서

    버퍼사용을 안하고 그냥 saline solution에 녹여서 반응을 진행해 보세요.

    오히려 투석에 걸리는 시간이 줄어들어 알부민의 변성을 최소화 할 수 있을것 입니다.

    아예 멸균 증류수에도 시도해 해 보시고.....

     

    관련 회원분의 답변을 전달해 드립니다.

    What is 코너 담당 김재훈 드림.

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    알무민의 용해시간 / 알부민과 약물의 결합반응시간을 최소화해서

    버퍼사용을 안하고 그냥 saline solution에 녹여서 반응을 진행해 보세요.

    오히려 투석에 걸리는 시간이 줄어들어 알부민의 변성을 최소화 할 수 있을것 입니다.

    아예 멸균 증류수에도 시도해 해 보시고.....

     

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