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HPLC를 의뢰하여 측정하였는데
이딴식으로 데이터를 보내줬네요
기기는 waters 의 HPLC이구요
시료의 농도는 0.1 %입니다.
3분대에 나온 가장 큰 peak가 짤렸는데 Y축의 크기를 더 높일 수 없나요?
측정해 준 오퍼레이터가 Y축 조절을 못한다는데
이해할 수 없군요.
그리고 HPLC 측정시 적절한 시료 농도가 어떻게 되나요??
- HPLC
- 분석
각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변
조윤환님의 답변
2011-12-19- 0
크로마토그램으로 봐선 농도가 다소 높은 것이 아닌가 싶습니다.
사실 측정 농도는 검출기나 컬럼이 감당할 수 있는 범위 내라면 어떤 농도이든 상관은 없습니다.
너무 농도가 높으면 피크 꼭대기가 칼로 자른 것처럼 되어 버립니다. 한계치를 지나쳐 버렸기 때문입니다. 컬럼이 감당할 수 있는 농도 이상이면 분리가 제대로 않되겠죠.
하지만 이러한 것들은 물질마다 그 수치가 다릅니다.
전 의약품 분석(방향족 고리가 있는)을 주로 하는데.... 100~500 ug/ml 이내 농도범위가 대부분입니다. 시료의 농도는 목적에 따라서도 달라 집니다. 주성분의 함량분석을 할 때 보다는 불순물 분석 시료가 더 농도가 높습니다. 적은량 존재하는 것들을 분석해야 하니까요.
또 정량 분석이라면 분석대상의 검량선이 직선성을 유지하는 농도 범위여야 합니다.
크로마토그램의 x축과 y축 스케일은 변경 가능합니다. 데이터핸들링 sw에 따라 조금씩 다르니 확인하셔야 하고요....제가 차트를 보니 autoscale로 하셨군요. autoscale로 하더라도 sw에 따라 주피크의 크기를 y축 전체 스케일에 몇 % 정도로 맞출 것인지 설정 가능한 걸로 압니다. 저는 함량분석시엔 대략 70% 정도로 맞추도록 합니다. 불순물 분석시엔 주피크에 y축 스케일을 맞추면 불순물 피크를 관찰하기 어려우므로 user define으로 설정하고요.
HPLC분석을 의뢰해서 하셨다고 하셨는데..... 분석법 뿐만 아니라 시료의 농도, 전처리방법 등을 모두 정해주신 것은 아닌 것 같습니다. 그럴 경우 분석자가 이 모든 것을 실험을 통해 결정하고 검증해야 하는데..... 해보시면 아시겠지만.......보통 일이 아닙니다.
분석법의 개발과 검증을 해보시면 아시겠지만......엄청난 시간과 노력이 필요합니다. 오퍼레이터분이 y 축 변경이 안된다고 하셨다는 걸로 봐선 경험이 많지 않은 분 같습니다. 아니면 다른 의도 때문일 수도 있고요. 경험이 많지 않은 분이라면 충분한 시간과 선의를 가지고 있더라도 더 기대하기 어렵습니다.
분석법을 확립하는 작업은 단순히 피크를 확인하고, 분리되었다고 다 된 것이 아니라는 점을 이해하셨으면 합니다. 저도 기본적인 방향과 큰틀만 정하는 일만 하고.... 실질적인 분석이나 검증작업은 제 동료들에게 부탁하는 입장입니다만....분석자 입장에서 완전히 확립되지 않은 분석법으로 시료를 의뢰 받으면..... 어떤 경우엔 좀 황당하기까지 합니다.
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HPLC를 의뢰하여 측정하였는데
이딴식으로 데이터를 보내줬네요
기기는 waters 의 HPLC이구요
시료의 농도는 0.1 %입니다.
3분대에 나온 가장 큰 peak가 짤렸는데 Y축의 크기를 더 높일 수 없나요?
측정해 준 오퍼레이터가 Y축 조절을 못한다는데
이해할 수 없군요.
그리고 HPLC 측정시 적절한 시료 농도가 어떻게 되나요??
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답변
김상태님의 답변
2011-12-30- 0
답글-------------------------------------질문-------------------------------------
HPLC를 의뢰하여 측정하였는데
이딴식으로 데이터를 보내줬네요
기기는 waters 의 HPLC이구요
시료의 농도는 0.1 %입니다.
3분대에 나온 가장 큰 peak가 짤렸는데 Y축의 크기를 더 높일 수 없나요?
측정해 준 오퍼레이터가 Y축 조절을 못한다는데
이해할 수 없군요.
그리고 HPLC 측정시 적절한 시료 농도가 어떻게 되나요??
-hplc의 분석결과가 표준물질의 분석 한계치와 범위내에서 측정해야 하는데 아마도 분석물질을 표준물이 없어서 그렇다고 봄 지시법을 분석하기 전에 표준물품을 동시에 보내기 바람