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황색포도상구균에 대한 성장곡선을 만드려고 하는데요.
TSB+NaCl(10ml) 에서 seed culture를 하고
여기에서 2ml를 빼서 100ml TSB+NaCl에 다시 접종을 하고
이것을 배양하면서 시간별로 od 하고 cfu를 측정하려고 하는데요.
3시간째, 6시간째 cfu를 보면 0시간 대비해서 균이 거의 안자랐거든요.
어디에서 문제가 있는걸까요?
od값도 6시간째까지 거의 비슷합니다.
또, 100ml TSB있는 플라스크에서 건더기 같은게 많이 생겼는데..
이것도 원래 이런건가요?
전자과 라서 미생물쪽에 잘 몰라서요.
- 미생물
- 황색포도상구균
각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변
유용규님의 답변
2012-01-12- 0
우선 정치배양을 하신건지.. 교반배양을 하신건지... 그걸 먼저 확인하시구요....
두번째는 생장실험을 하실때 control로 배지만 넣고 균을 접종하시 않은 것을 같이 하셨는지 묻고 싶습니다.
TSB 배지는 웬만하면 침전 안생겨요... 저의 경우 침전생긴걸 본적이 없어요...
제 생각에는 그게 균일거라는 생각이 드네요.... 교반을 않해서 애들이 바닥에 가라앉은건 아닌지요... 검경을 해보세요 그래서 구균애들이 보여면 확실하겠죠...
실험하실때 negative control을 함께 하시면 배지의 오염유무를 같이 확인 할 수 있고요....
포도상구균은 운동성이 없으니깐 교반안하면 가라앉을거에요... 말그대로 포도송이처럼 뭉치는 특성이 있거든요
삼각플라스크는 배양용 플라스크를 추천합니다. 바닥에 십자형태로 솟아있거나 옆면에 손잡이처럼 안으로 돌출된 형태입니다.
그리고 호기배양시에는 위에 stopper는 paper나 cotton stopper를 사용하실때 완전히 밀봉되서 당기면 뻥 소리 나도록 막으세요
ㅗ우ㅠ-------------------------------------질문-------------------------------------
황색포도ㄷ상구균에 대한 성장곡선을 만드려고 하는데요.
TSB+NaCl(10ml) 에서 seed culture를 하고
여기에서 2ml를 빼서 100ml TSB+NaCl에 다시 접종을 하고
이것을 배양하면서 시간별로 od 하고 cfu를 측정하려고 하는데요.
3시간째, 6시간째 cfu를 보면 0시간 대비해서 균이 거의 안자랐거든요.
어디에서 문제가 있는걸까요?
od값도 6시간째까지 거의 비슷합니다.
또, 100ml TSB있는 플라스크에서 건더기 같은게 많이 생겼는데..
이것도 원래 이런건가요?
전자과 라서 미생물쪽에 잘 몰라서요.
유용규(abiho) 2012-01-12너무 오래키울경우 덩어리가 커지기도 합니다. 우선 검경을 해서 구균들이 보이는지.. 아니면 다른균들이 섞여있는지.... 이물질들이 보이는지를 먼저 판단해보셔야 다음 단계로의 진행이 가늘할 거라고 생각됨니다.
seed culture, 100ml TSB culture 모두 진탕(150rpm) 배양 했습니다.
저도 몇군데 알아보기 황색은 건더기같이 생기는게 정상이라고는 하네요.
그런데 플라스크에서 건더기가 너무 커서 잘못된게 아닌가 싶구요.
또한, 플라스크는 일반 플라스크 250ml 을 사용했고
입구는 silicon stopper 을 이용해서 막았습니다.