2012-05-08
org.kosen.entty.User@f1e5644
박은식(dark3232)
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안녕하세요.
해수에 포함되어 있는 염분을 제거하려고합니다.
여러가지 방법을 해봤고,
Sephadex g-10을 이용해서 gel filteration해볼려고 합니다.
gel filteration 방법에 대해서 여러분들의 지식을 나눠 주시면 감사하겠습니다.
bus0215@hanmail.net 로 답변주시면 감사할 것 같습니다.
- gel filteration
- SEPHADEX G10
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변 3
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답변
강광철님의 답변
2012-05-08- 0
첨부문서에 겔 필트레이션에 관하여 자세히 나왔으니 보시면 될듯？네요. -
답변
이원규님의 답변
2012-05-11- 0
아마 실험실에 resin 만 있는 것 같네요. FPLC 같은 장비가 있으면 더 편하게... 도움이 될 것 같은데... 만약에 그런 장비가 없다면... Empty column을 사용하거나 (보통 유리나 plastic 으로 되어 있습니다. )그것도 없다면 빈 유리관이나 빈 플라스틱 튜브 심지어 스포이드의 유리관을 사용할 수도 있습니다. 하지만... 역시 전용 column을 추천하고 싶네요. Resin을 장 충진하시고...샘플의 종류나 실험에 따라 얼마의 resin을 쓸지는 본인이 선택 하셔야 합니다.그리고 충분한 부피의 물로 우선 씻어주세요. 5배 이상 부피의 물로 흘려주시면 될 것 같습니다. 그리고 나서 원하는 완충용액으로 역시 흘려주세요. 보통 2배에서 10배 정도의 부피라면 충분히 완충용액이 바뀔 것 입니다. 아직 아무런 실험 경험이나 노하우가 없다면 먼저 column에 색깔을 띠는 물질을 약간 흘려 보세요. 그리고 실험실에 있는 단백질 중에서 값 싸고 양 많은 거를 한번 흘려 보세요. 그럼 단백질이 어느 분획에서 나오는지에 대해 감이 잡히고 또 salt와 같은 제거해야 할 것들이 어디 나오는지도 알 수 있습니다. 이런 것들이 다 확인 된 후에 바닷물을 제거하기 위한 sample을 흘려주시면 됩니다. 다시 말씀 드리지만... 샘플의 부피, 농도 등에 따라 column에 충진해야 할 resin의 종류 및 양이 결정 됩니다. 해서 꼭 resin의 설명서를 확인하시고 column을 준비하세요. 가장 편한건... Desalting 용으로 나온 pre-packed column을 쓰시는 것 입니다. 혹시라도 더 도움이 필요하시면 연락 주세요. ^^ -
답변
조은애님의 답변
2012-05-17- 0
첨부파일
간단히 open column을 사용하는 방식을 말씀드립니다. sig- 등에서 gel을 구입하고, 업체에 glass column을 주문 제작 하세요. column에서 elution되는 유속을 일정하게 유지하기 위해 peristaltic pump도 필요하고, eluent를 받기위해 fraction collector도 갖추는게 좋습니다. 주문시 column은 glass filter를 끝에 장착하고 직경과 길이를 지정해 주시면 됩니다. gel은 먼저 사용전에 gel 에 D.W.를 넣어서 rt에서 overnight 해서 swelling이 된다음 vacume flask에 붓고 degassing해서 공기를 빼줍니다. slurry 상태의 gel을 column에 채워주세요. gel이 packing되고 하루 정도 있다가 sample을 loading하시면 분자량 1000 이하의 염분을 desalting 할 수 있습니다. 그런데, 제 생각엔 해수에는 염분이 많아서 sephadex G-10으로 desalting이 충분히 될까 하는 의문입니다. sample 양을 조금만 로딩한다면 문제는 없을 것으로 생각되지만, 만일 sample이 많은 양이라면 dialysis가 보다 효율적일 것으로 생각됩니다. 더 궁금하신점 있으면 메일 주세요 (12remona@naver.com)