지식나눔

collagenase 처리시 인큐베이터 문제.

안녕하세요, collagenase처리를 위해 인큐베이터 사용시 문을 열면 온도가 5~8도 정도 떨어지고 보구되는데 20분이상 걸립니다. 효소 처리는 30분 정도 진행됩니다. 30분 처리중 20분이 상대적 저온인데 문제가 없나요? 아니면 이에대한 근거 논문 같은게 있을까요?
  • collagenase
  • 활성온도
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답변 2
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    오현주님의 답변

    저는 type II collagenase를 사용하는데요 그정도에 민감성은 확인하지 못했습니다. 활성이 남아있다는 뜻이지요 인큐베이터로 인해 손상은 없을 듯 합니다. 단지 얼마나 sensitive한 실험을 하느냐입니다. 근데 문제는 인큐베이터에 온도가 올라가는데 오래걸리는 것과 인큐베이터에 온도가 급격히 떨어지는데 문제가 있을 듯 합니다.
    저는 type II collagenase를 사용하는데요 그정도에 민감성은 확인하지 못했습니다. 활성이 남아있다는 뜻이지요 인큐베이터로 인해 손상은 없을 듯 합니다. 단지 얼마나 sensitive한 실험을 하느냐입니다. 근데 문제는 인큐베이터에 온도가 올라가는데 오래걸리는 것과 인큐베이터에 온도가 급격히 떨어지는데 문제가 있을 듯 합니다.
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    홍동호님의 답변

    저는 우선 궁금한 것이 왜 인큐베이터에 하는지 궁금합니다. 제가 하는 조건은 항온 수조에 38-40 도 정도에 인큐베이션 하면 세포 분리 및 여러가지 조건에 적합할 것으로 생각됩니다. 물론 세포를 분리할 때는 항온수조에 5분 정도 담가 주고 30-40초 Vortex 하면 세포 분리는 잘 됩니다.
    저는 우선 궁금한 것이 왜 인큐베이터에 하는지 궁금합니다. 제가 하는 조건은 항온 수조에 38-40 도 정도에 인큐베이션 하면 세포 분리 및 여러가지 조건에 적합할 것으로 생각됩니다. 물론 세포를 분리할 때는 항온수조에 5분 정도 담가 주고 30-40초 Vortex 하면 세포 분리는 잘 됩니다.
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