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지식나눔

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scaffold powder subcutaneous implantation of mouse 방법 질문이요..

2012-11-13 org.kosen.entty.User@6dcc7cca 신근구(skk3210)
  • 1

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안녕하세요. 이런 저런 방법으로 해보았는데, 도저히 명확한 답을 찾을 수가 없어서 이렇게 질문을 드립니다. scaffold+cell 을 마우스에 subcutaneous implantation 시킬려고 하는데요, 여기서 문제는 scaffold가 block type 이 아닌 powder(granule)type 이라는 것입니다. 요즘은 powder type이 더 효과가 있다고 많이들 사용하는 것으로 알고 있는데, cell과 incubation 후에 어떤 방식으로 이 powder를 안정적으로 이식할 수 있는지 모르겠더라고요. 주사기도 생각해보구 gel과 섞어서 사용하는 방법도 생각해보았으나.. 문제는 powder가 무거워서 pipet으로도 옴길 수 없고, gel에 굳히면 가라앉아버리고.. 수술쪽 문제가 아니라 powder의 이동 및 고정이 문제였습니다. 이래도 안되고 저래도 안되고 난감하더라구요. 조언쩜 꼭 부탁드립니다. 첨부한 논문의 fig.1 처럼 scaffold powder가 뭉쳐서 자리잡을 수 있는 방법을.. ㅠ
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답변 1
  • 답변

    배기현님의 답변

    2012-11-14
    • 2

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    scaffold powder가 무거워서 파이펫으로 옮기기 어려울 정도이고 젤에 굳히면 가라앉는다고 하셨는데요.. 사용하신 젤 종류는 모르겠으나 어떤 젤 종류는 강도가 세지 않고 젤 형성 시간이 수십분 정도 걸립니다. 그래서 젤에 굳힌 이후에도 scaffold powder가 무거워서 젤에서 가라앉는 문제가 생기는 듯 합니다. 제 생각에는 빠르게 형성되면서도 어느 정도 강도가 있는 젤 종류를 사용해서 scaffold/cell 혼합액을 젤에서 빠르고 안정하게 고정시키면 좋을 듯 합니다. 제가 대학원 다닐 때 사용해본 하이드로젤을 추천해드립니다. Extracel™ Hydrogel Kit (Glycosan)이라는 하이드로젤이고요 http://www.glycosan.com/hyaluronan-based/ 동인바이오텍(http://www.donginbio.com/)에서 구했었습니다. 원래 ExtraCel kit에는 Glycosil™, Gelin-S™, Extralink™ 세 가지 물질이 있어서 주어진 실험방법대로 섞으시면 20분 내에 하이드로젤이 형성됩니다(첨부 파일1 참고). 하지만 Extralink™의 농도를 증가시키면 15분부터 최소 4분까지 젤 형성 시간을 짧게 조절하실 수 있습니다(첨부 파일2의 4쪽 참고). 가능한 implantation 방법은 2 가지로, 1) 젤 형성 시간을 적절히 조절하셔서 (대략 4-7분 정도) 젤이 형성되는 중간에 마우스에 subcutaneous implantation하시는 방법. (이때 파이펫 사용이 어렵다면 미리 정량을 멸균된 tube나 dish에 준비하신 후에 그대로 붓거나 멸균된 약수저로 옮기는 방법이 있습니다.) 2) 위의 방법이 어렵다면 젤을 형성시키신 후에 그 젤을 마우스에 subcutaneous implantation하는 방법이 있을 것 같네요.
    답변수정
    scaffold powder가 무거워서 파이펫으로 옮기기 어려울 정도이고 젤에 굳히면 가라앉는다고 하셨는데요.. 사용하신 젤 종류는 모르겠으나 어떤 젤 종류는 강도가 세지 않고 젤 형성 시간이 수십분 정도 걸립니다. 그래서 젤에 굳힌 이후에도 scaffold powder가 무거워서 젤에서 가라앉는 문제가 생기는 듯 합니다. 제 생각에는 빠르게 형성되면서도 어느 정도 강도가 있는 젤 종류를 사용해서 scaffold/cell 혼합액을 젤에서 빠르고 안정하게 고정시키면 좋을 듯 합니다. 제가 대학원 다닐 때 사용해본 하이드로젤을 추천해드립니다. Extracel™ Hydrogel Kit (Glycosan)이라는 하이드로젤이고요 http://www.glycosan.com/hyaluronan-based/ 동인바이오텍(http://www.donginbio.com/)에서 구했었습니다. 원래 ExtraCel kit에는 Glycosil™, Gelin-S™, Extralink™ 세 가지 물질이 있어서 주어진 실험방법대로 섞으시면 20분 내에 하이드로젤이 형성됩니다(첨부 파일1 참고). 하지만 Extralink™의 농도를 증가시키면 15분부터 최소 4분까지 젤 형성 시간을 짧게 조절하실 수 있습니다(첨부 파일2의 4쪽 참고). 가능한 implantation 방법은 2 가지로, 1) 젤 형성 시간을 적절히 조절하셔서 (대략 4-7분 정도) 젤이 형성되는 중간에 마우스에 subcutaneous implantation하시는 방법. (이때 파이펫 사용이 어렵다면 미리 정량을 멸균된 tube나 dish에 준비하신 후에 그대로 붓거나 멸균된 약수저로 옮기는 방법이 있습니다.) 2) 위의 방법이 어렵다면 젤을 형성시키신 후에 그 젤을 마우스에 subcutaneous implantation하는 방법이 있을 것 같네요.
    신근구(skk3210) 2014-01-28

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    배기현(bkheun82) 2014-01-28

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