2012-11-19
org.kosen.entty.User@3f40a790
김현진(nalvi77)
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aptamer와 samll protein을 conjugation 시킨 후 HPLC로 분리하려고 하는데 어떤 컬럼을 사용해야 하나요? 분자량은 대략 10000 정도 되는데 RP C18 column을 사용해서 분리가 가능한가요? 그리고 이걸 mass로 확인하려고 하는데 MALDI, ESI 중 어떤 것이 더 적합한가요?
- aptamer
- HPLC
- Mass
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답변 1
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답변
최선규님의 답변
2012-11-26- 0
HPCL에서 보통 peptide를 분리 할때는 C18을 사용하고 protein을 분리 할때는 C4 혹은 C8 컬럼을 사용 합니다. 하지만 10000 Da정도의 작은 사이즈라서 C18도 잘 분리 할 수 있을것 같습니다. 정확한 분자량을 측정 하길 원한다면 ESI-FTICR 이나 ESI-orbitrap mass spectrometry를 사용 하시는것이 좋습니다. 대충의 분자량을 측정하길 원하시면 MALDI에서도 분석 가능합니다. ㄱ러나 aptamer가 negative charge를 갖고 있어서 감도가 좋은 mass spectrometry를 사용 하시는것이 좋을 것 같습니다. 더 자세한 사항은 한국기초과학지원 연구원 질량분석연구부에 문의 하시면 실제 시료분석에 대해서 더 자세히 알 수 있습니다.