지식나눔

prep-TLC와 Sep-Pak에 대해 문의합니다.

안녕하세요. 저는 한국생명공학연구원에서 일하고 있는 연구원입니다. 제가 천연물화학을 여기 와서 처음 접해보는데.. 저희 박사님께서 prep-TLC로 분리를 한 후에 sep-pak으로 한번 더 정제를 하라고 하시더군요.. prep-TLC에 F254가 코팅되어 있으므로 그것을 분리해야 한다고.. 근데 계속 논문을 찾아보고 여기저기 검색을 해 보아도 F254 분리를 한다고 나오는 곳은 못찾았습니다.. 그리고 sep-pak도 아직 제가 한번도 써보지 않았기에 조건을 어떻게 잡아야 할 지도 모르겠구요.. 연구실에는 sep-pak이 종류별(C18, CN, Silica 등등)로 사이즈도 다양하게 구비는 되어 있는데, 모두 syringe처럼 생겨 있어 사용법도 잘 모르겠습니다.. 아시는 분 계시면 답변 부탁드립니다. 감사합니다.
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답변 1
  • 답변

    조윤환님의 답변

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    prep-TLC에서 F254는 분리 대상이 아니고 spot의 위치를 파악하기 위해 TLC에 미리 loading 해 놓은 형광물질 입니다. UV 254nm에 반응하는 물질이죠. 아시겠지만 254nm면 대다수 방향족 화합물들이 흡수를 일으키는 파장 영역 입니다. 따라서 TLC 원판에 254nm 파장의 UV램프를 비추면 전체 영역이 형광(yellowgreen)으로 빛나죠. 하지만 이 파장영역을 흡수하는 물질이 TLC 판위에 존재하면 그 부분만 어둡게 나타납니다. pre-TLC 올린 후에 어둡게 나타나는 부분을 긁어내서 용매로 추출해낸 다음 다시 seppak으로 정제하면 된다는 뜻입니다. Fluorescence indicator인 F254를 시료에서 제거해야한다는 뜻은 아닐겁니다. 제가 알기로는 TLC plate에 포함되어 있는 Fluorescence indicator는 inorganic compound입니다. 따라서 유기용매로 목적물질을 추출할 때 전혀 영향을 미치지 않습니다. sep-pak의 사용법은 가지고 있는 제품의 사용설명서 또는 해당제품 생산업체에서 제공하는 기술문서를 참고하시면 가장 정확합니다. 크게 소수성, 친수성 등으로 나눌 수 있는데....정제하려고하는 물질과 제거하려고 하는 물질의 성질에 따라 선별해서 사용하시면 되겠습니다. 원리와 사용방법에 대해 간단하게 설명된 자료를 하나 추천해 드리니 확인해 보시길 권합니다. 아래 링크를 따라 가시면 로그인 화면이 보입니다. 로그인 하지 마시고 좌측에 1~25번 목차를 차레로 누르면 내용 열람이 가능합니다. 예전에 세미나할 때 활용했던 자료인데.....애니메이션으로 잘 설명되어 있습니다. 그래픽에 있는 재생버튼을 누르면 애니메이션이 실행되면서 원리를 알기 쉽게 설명해 줍니다. 참고가 되셨길.... 참고1 : http://www.chromacademy.com/frameset-chromacademy.html?fChannel=2&fCourse=3&fSco=54&fPath=sco54/psp_C7_019.asp 참고 2 : http://www.waters.com/waters/nav.htm?cid=513209&xcid=x3241 참고 3 : http://www.waters.com/waters/nav.htm?cid=134721476
    prep-TLC에서 F254는 분리 대상이 아니고 spot의 위치를 파악하기 위해 TLC에 미리 loading 해 놓은 형광물질 입니다. UV 254nm에 반응하는 물질이죠. 아시겠지만 254nm면 대다수 방향족 화합물들이 흡수를 일으키는 파장 영역 입니다. 따라서 TLC 원판에 254nm 파장의 UV램프를 비추면 전체 영역이 형광(yellowgreen)으로 빛나죠. 하지만 이 파장영역을 흡수하는 물질이 TLC 판위에 존재하면 그 부분만 어둡게 나타납니다. pre-TLC 올린 후에 어둡게 나타나는 부분을 긁어내서 용매로 추출해낸 다음 다시 seppak으로 정제하면 된다는 뜻입니다. Fluorescence indicator인 F254를 시료에서 제거해야한다는 뜻은 아닐겁니다. 제가 알기로는 TLC plate에 포함되어 있는 Fluorescence indicator는 inorganic compound입니다. 따라서 유기용매로 목적물질을 추출할 때 전혀 영향을 미치지 않습니다. sep-pak의 사용법은 가지고 있는 제품의 사용설명서 또는 해당제품 생산업체에서 제공하는 기술문서를 참고하시면 가장 정확합니다. 크게 소수성, 친수성 등으로 나눌 수 있는데....정제하려고하는 물질과 제거하려고 하는 물질의 성질에 따라 선별해서 사용하시면 되겠습니다. 원리와 사용방법에 대해 간단하게 설명된 자료를 하나 추천해 드리니 확인해 보시길 권합니다. 아래 링크를 따라 가시면 로그인 화면이 보입니다. 로그인 하지 마시고 좌측에 1~25번 목차를 차레로 누르면 내용 열람이 가능합니다. 예전에 세미나할 때 활용했던 자료인데.....애니메이션으로 잘 설명되어 있습니다. 그래픽에 있는 재생버튼을 누르면 애니메이션이 실행되면서 원리를 알기 쉽게 설명해 줍니다. 참고가 되셨길.... 참고1 : http://www.chromacademy.com/frameset-chromacademy.html?fChannel=2&fCourse=3&fSco=54&fPath=sco54/psp_C7_019.asp 참고 2 : http://www.waters.com/waters/nav.htm?cid=513209&xcid=x3241 참고 3 : http://www.waters.com/waters/nav.htm?cid=134721476
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