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지식나눔

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세포배양과 젤라틴

2013-04-16 org.kosen.entty.User@50dd5ca5 김성포(JIDOJA)
  • 1
fibroblast 세포주를 배양하는데 있어, 배양배지에 젤라틴을 1mg/ml 로 녹여서 배양할때 배지에서만 배양한 경우에 비하여 생존율(MTT assay)이 저하하는 원인이 궁금합니다.
  • 세포배양
  • 젤라틴
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답변 1
  • 답변

    배기현님의 답변

    2013-04-17
    • 3

    첨부파일

    안녕하세요 fibroblast 세포주를 배양할 때, 배지에 젤라틴을 녹여서 배양하고 계시는군요. 일반 배지에서만 배양한 경우에 비하여 세포 생존율이 저하하는 원인에 대해서 질문을 해주셨는데요. 제가 생각했을 때 배지 안의 젤라틴에 의하여 세포 부착이 저해되어서 세포 생존율이 저하되었을 가능성이 있습니다. 일반적으로 젤라틴은 culture dish를 코팅해서 세포 부착을 증가시키는데 많이 쓰입니다. 그 이유는 젤라틴이 콜라겐(collagen)에서 유래하여 RGD(Arg-Gly-Asp)라는 세포부착 펩타이드를 많이 지니고 있기 때문입니다. 하지만 배지에 젤라틴을 넣었을 때에는 그 농도에 따라 정반대의 결과를 얻을 수도 있습니다. 그 이유는 젤라틴이 RGD 펩타이드를 갖고 있어서 부착된 세포들을 dish 바닥에서 떼어내고 apoptosis를 일으킬 수 있기 때문입니다. 이러한 현상은 아래 논문에 발표된 바가 있습니다. 참고해보시면 도움이 될 것 같습니다. Nature. 1999 Feb 11;397(6719):534-9. RGD peptides induce apoptosis by direct caspase-3 activation. Buckley CD, Pilling D, Henriquez NV, Parsonage G, Threlfall K, Scheel-Toellner D, Simmons DL, Akbar AN, Lord JM, Salmon M. http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/10028971
    답변수정
    안녕하세요 fibroblast 세포주를 배양할 때, 배지에 젤라틴을 녹여서 배양하고 계시는군요. 일반 배지에서만 배양한 경우에 비하여 세포 생존율이 저하하는 원인에 대해서 질문을 해주셨는데요. 제가 생각했을 때 배지 안의 젤라틴에 의하여 세포 부착이 저해되어서 세포 생존율이 저하되었을 가능성이 있습니다. 일반적으로 젤라틴은 culture dish를 코팅해서 세포 부착을 증가시키는데 많이 쓰입니다. 그 이유는 젤라틴이 콜라겐(collagen)에서 유래하여 RGD(Arg-Gly-Asp)라는 세포부착 펩타이드를 많이 지니고 있기 때문입니다. 하지만 배지에 젤라틴을 넣었을 때에는 그 농도에 따라 정반대의 결과를 얻을 수도 있습니다. 그 이유는 젤라틴이 RGD 펩타이드를 갖고 있어서 부착된 세포들을 dish 바닥에서 떼어내고 apoptosis를 일으킬 수 있기 때문입니다. 이러한 현상은 아래 논문에 발표된 바가 있습니다. 참고해보시면 도움이 될 것 같습니다. Nature. 1999 Feb 11;397(6719):534-9. RGD peptides induce apoptosis by direct caspase-3 activation. Buckley CD, Pilling D, Henriquez NV, Parsonage G, Threlfall K, Scheel-Toellner D, Simmons DL, Akbar AN, Lord JM, Salmon M. http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/10028971
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