지식나눔

GPC column 문의

제가 혼합물중에 포함된 단백질을 정량하려 하는데요 사정상 제가 실험하기 어려워 의뢰를 하려고 합니다 컬럼 걸기 전에 전처리를 해야한다는건 아는데 너무 많은 것들(지방, 염분, 회분, 미네랄 등)이 섞여있어서 전처리를 다하는데 어려움이 있더라구요 - TSK gel G 2000 SWXL 300 nm x 7.8 mm 이 컬럼을 사용하려 하는데 이런 종류의 컬럼에 아세토나이트릴 : 물 : 트리플루오로아세트산을 45:55:0.1로 해서 용매로 사용할 거구요 UV detector로 220nm에서 찍으려하는데 단백질 외에 다른 물질이 피크로 걸릴 가능성이 있을까요?
  • GPC
  • SEC
  • 컬럼
지식의 출발은 질문, 모든 지식의 완성은 답변! 
각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
답변 1
  • 답변

    배기현님의 답변

    첨부파일

    안녕하세요 혼합물중에 포함된 단백질을 정량하려고 하시는군요. 혼합물이 지방, 염분, 회분, 미네랄 등으로 구성되어 있다고 하셨는데요 전처리를 완벽하게 하지 않는다면 220 nm에서 흡광을 나타내는 불순물이 섞여있을 가능성이 높다고 생각이 듭니다. 특히 혼합물이 생물조직에서 유래한 것이라면 많은 종류의 biomolecule(DNA, NADH 등)이 220 nm의 빛을 흡수하므로 더욱 분석이 어려워질 가능성이 높습니다. 단백질을 분석하시고자 하신다면, 간섭의 가능성이 높은 220 nm보다는 일반적으로 많이 이용되는 280 nm의 흡광도를 이용하여 분석하시는 것이 좋을 것 같습니다.
    안녕하세요 혼합물중에 포함된 단백질을 정량하려고 하시는군요. 혼합물이 지방, 염분, 회분, 미네랄 등으로 구성되어 있다고 하셨는데요 전처리를 완벽하게 하지 않는다면 220 nm에서 흡광을 나타내는 불순물이 섞여있을 가능성이 높다고 생각이 듭니다. 특히 혼합물이 생물조직에서 유래한 것이라면 많은 종류의 biomolecule(DNA, NADH 등)이 220 nm의 빛을 흡수하므로 더욱 분석이 어려워질 가능성이 높습니다. 단백질을 분석하시고자 하신다면, 간섭의 가능성이 높은 220 nm보다는 일반적으로 많이 이용되는 280 nm의 흡광도를 이용하여 분석하시는 것이 좋을 것 같습니다.
    박준우(gbj99) 2014-04-20

    ?????????????????????????????????????????????????? ???????????????????????????????? ????????????????????????????????? GPC???????????????? ???????????????????????????????????????????????????????? ????????????????????????????????????????????????? ????????????????????????????????????????????????????????????????? ????????????????????????????????????????????????????????????????? ?????????????????????????....280nm???????????????????????????????? ?????????????????????????????????????????????????? ????????????????????????????????? ???????????????????????????????????????? ????????????????????????????????? ?????????????????????????????????????????????????????????????????

    ????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????? ????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????? ???????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????? ????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????? ?????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????.^^