2013-05-15
org.kosen.entty.User@6a9ba17
이준성(letmedream)
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안녕하세요.
재료 전공인데 생물은 완전 초보라서 고수님들께 질문 드립니다.
이번에 저희 연구실에서 CD63이라는 protein의 이동과 exosome으로의 분비에 대해 연구를 하고 있는데(exosome이라고 세포에서 분비하는 vesicle이 있는데 거기에 CD63이 꼭 딸려 들어간다고 하더라구요.) 그래서 CD63에 GFP가 tagging된 lentiviral vector를 구입했습니다. 그런데 이놈이 만드는 CD63이 human CD63이더라구요. 이 vector를 B16이나 CT26같은 mouse cell에 사용해도 될까요? mouse CD63과 human CD63은 BLAST돌려보니까 일치율이 79%더라구요.(positives는 무슨 말인지 모르겠지만 88%나오구요)
요약하자면 이 벡터를 mouse cell에 집어넣으면 세포안에서 human CD63을 만들건데 이게 mouse CD63처럼 역할을 할 수 있을까요? 물론 해봐야 알겠지만 그냥 기본적인 상식차원에서 (설령 된다고 하더라도) 이렇게 실험해도 되는 걸까요?
고수님들의 조언 부탁드립니다. 좋은 하루 보내세요.
- lentiviral vector
- exosome
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답변 1
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답변
심우영님의 답변
2019-04-30- 0
1. Post-translation modification이 정확하게 일어나야 됩니다.
2. Mouse의 CD63의 중요 domain의 sequence가 일치하여 functional domain의 구조가 일치해야 됩니다.
3. transplation 혹은 transcription에 있어 loss없이 high-copy 수준의 expression이 일어나야 합니다.
최소한 위에 3가지가 만족되어야 기능을 할 수 있을 겁니다.