지식나눔

perfusion protocol에 대해 관하여

조직검사를 하려는 방법중 하나 인 perfusion 실험인데 여기서 perfusion을 어떤식으로 하는지를 몰라 실험 과정을 좀 설명해주셧으면 합니다. cryolblock cryosection이방법도 여기에 속한다는 것을 아는데 특히 cryoblock은 찾아봐도 나오질 않아서 올려봅니다.
  • perfusion
  • cryoblock
  • cryosection
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답변 1
  • 답변

    윤창호님의 답변

    Perfusion은 혈액이 많은 조직 등을 면역화학실험법 등을 통해 실험하고자 할때 사용하는 전처리 과정입니다. 
    또한 간과 같은 조직에서 primary cell을 culture하기 전에도 사용합니다. 
    다양한 방법이 있긴하지만
    가장 간단한 심장을 이용한 perfusion이 있습니다. 살아있는 동물의 심장에 PBS 를 넣어 순환시켜 피를 제거하는 방법이며 그 이후 포르말린 계열의 고정액을 이용하여 조직 고정 후 적출하게 됨니다. 

    그 후 , cryo block을 만들어 조직학 실험을 할 수 있는데 낮은 온도에서 조직 demage를 보호하기 위해 20% sucrose에 하루 정도 넣어서 soaking한 후 OCT compound등으로 낮은 온도에서 얼리게 되면 block 을 만들 수 있습니다. 이 것을 이용해 cryostat에서 section을 만들면 실험에 사용할 수 있습니다. 흔히 아는 파라핀 section과는 구별되는 방법으로 장단점이 있습니다. 
     
    Perfusion은 혈액이 많은 조직 등을 면역화학실험법 등을 통해 실험하고자 할때 사용하는 전처리 과정입니다. 
    또한 간과 같은 조직에서 primary cell을 culture하기 전에도 사용합니다. 
    다양한 방법이 있긴하지만
    가장 간단한 심장을 이용한 perfusion이 있습니다. 살아있는 동물의 심장에 PBS 를 넣어 순환시켜 피를 제거하는 방법이며 그 이후 포르말린 계열의 고정액을 이용하여 조직 고정 후 적출하게 됨니다. 

    그 후 , cryo block을 만들어 조직학 실험을 할 수 있는데 낮은 온도에서 조직 demage를 보호하기 위해 20% sucrose에 하루 정도 넣어서 soaking한 후 OCT compound등으로 낮은 온도에서 얼리게 되면 block 을 만들 수 있습니다. 이 것을 이용해 cryostat에서 section을 만들면 실험에 사용할 수 있습니다. 흔히 아는 파라핀 section과는 구별되는 방법으로 장단점이 있습니다. 
     
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