지식나눔

PQQ LC 조건

안녕하세요. 미생물로 부터 PQQ 생산 실험을 하고 있습니다.

PQQ 분석을 위하여 standard 물질을 구입했는데요(시그마 http://www.sigmaaldrich.com/catalog/search?interface=All&term=pqq&lang=ko®ion=KR&focus=product&N=0+220003048+219853163+219853286&mode=match%20partialmax)
.

1. Pyrroloquinoline quinone :Methoxatin, PQQ?? ?C14H6N2O8
2. Methoxatin disodium salt : C14H4N2Na2O8? Molecular Weight 374.17

두가제 제품 중 2번을 이용하여 분석하였습니다.

두 제품이 같다고 생각하여 분석 조건을 잡았는데? 혹시 LC 상에서 같은 조건으로 실험하였을때 다르게 나올수 있을까요 ? disodium salt 외에는 다른것이 없는 제품인거 같은데요.

메탄올 이용균주를 이용한 PQQ 생산 실험에서 (배양액) PQQ 가 전혀 나오고 있지 않아
혹시? standard 문제 인가 해서 조언을 구합니다.



  • HPLC
  • PQQ
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답변 1
  • 답변

    조윤환님의 답변

    위와같이 분석에 따른 결과를 문의하실 때는 분석조건을 명시해주시는 것이 바람직합니다.

    HPLC분석의 경우 pH에 따라 분석결과가 달라질 수 있습니다.
    특히 PQQ처럼 유기산에 해당하는 물질의 경우 분석에 사용한 이동상의 pH가 분석결과에 큰 영향을 미칩니다.

    제 생각에 PQQ의 구조상 PQQ 2Na를 사용해서 분석 조건을 잡았고, 이동상에 완충용액을 사용하지 않았다면 피크의 RT가 매우 짧을 것입니다. 이런 경우 이동상에 산성 완충용액을 사용해서 조건을 잡아야 어느 정도 분리도를 기대할 수 있습니다. RT가 너무 짧으면 다른 물질과 분리되지 않을 가능성이 높습니다.

    분석 pH는 결과의 신뢰성에도 영향을 미칩니다. 산성 또는 염기성 물질은 pH에 따라 이온화 정도가 달라지고 그 정도에 따라 retention 정도가 달라지기 때문입니다. pH를 최적화하지 않으면 피크의 면적값이나 RT의 재현성이 낮아 집니다.?

    위와같이 분석에 따른 결과를 문의하실 때는 분석조건을 명시해주시는 것이 바람직합니다.

    HPLC분석의 경우 pH에 따라 분석결과가 달라질 수 있습니다.
    특히 PQQ처럼 유기산에 해당하는 물질의 경우 분석에 사용한 이동상의 pH가 분석결과에 큰 영향을 미칩니다.

    제 생각에 PQQ의 구조상 PQQ 2Na를 사용해서 분석 조건을 잡았고, 이동상에 완충용액을 사용하지 않았다면 피크의 RT가 매우 짧을 것입니다. 이런 경우 이동상에 산성 완충용액을 사용해서 조건을 잡아야 어느 정도 분리도를 기대할 수 있습니다. RT가 너무 짧으면 다른 물질과 분리되지 않을 가능성이 높습니다.

    분석 pH는 결과의 신뢰성에도 영향을 미칩니다. 산성 또는 염기성 물질은 pH에 따라 이온화 정도가 달라지고 그 정도에 따라 retention 정도가 달라지기 때문입니다. pH를 최적화하지 않으면 피크의 면적값이나 RT의 재현성이 낮아 집니다.?

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