지식나눔

small intestine 분리 중 지방 제거에 관련하여 질문 드립니다

마우스로부터 소장을 분리해서 wash하고 조각낸 뒤 EDTA를 처리하여 epithelial cell과

leukocyte를 분리하는 실험을 하고 있습니다. 그런데 나오는 epithelial cell과 leukocyte의 수에

비해 debris와 지방 등이 너무 많이 나옵니다. 여러 방법으로 wash를 해보았지만 잘 안되네요...

특히 소장에 붙어있는 지방을 아무리 잘 제거하려 해도 분리된 걸 보면 여전히 많이 남아 있습니

다 ㅠ.ㅠ  지방이나 debris를 깔끔하게 제거할 수 있는 방법이 있을까요?

혹시 이 실험을 해보신 분이나 하고 계신분들 조언 부탁드릴게요

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혹시 centrifugation을 해서 지방만 둥둥 뜨게 하거나 gradient를 이용해서 percoll로 지방을 제거할 수 있을까요?

 
  • intestine
  • debris
  • 지방
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
답변 1
  • 답변

    이배훈님의 답변

     지방/debris 제거는 보통 여러번의 원심분리 로 상층액을 제거 하는 것과
     100 um cell strainer을 이용 filter 하는 방법이 통상적으로 사용되고 있습니다.
     지방/debris 제거는 보통 여러번의 원심분리 로 상층액을 제거 하는 것과
     100 um cell strainer을 이용 filter 하는 방법이 통상적으로 사용되고 있습니다.
    이배훈(lbh217) 2014-03-17

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    염보현(ybhk2) 2014-03-18

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    염보현(ybhk2) 2014-04-19

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