지식나눔

DEAE 정제 실험

안녕하세요.

미생물 배양액에 있는  cofactor를 정제하고 있습니니다.

분자량이 330정도 되구요. DEAE (anion exchange)를 사용하고 있습니다. 

mw exclusion limit(KD) 는 500이구요
ion capacity(meq/g dry)가 1.3 이라고 나와있는데요

얼마의 DEAE에 1.3 (??) 이 bindig 된다는건지..

답변 부탁드려요 ~



 
  • DEAE
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답변 2
  • 답변

    이배훈님의 답변

    meq/g dry= milliequivalents/g dry

    1g 당 1.3 milliequivalents=1.3 milinormal 해당하는 이온을 교환처리 할 수 있음
    meq/g dry= milliequivalents/g dry

    1g 당 1.3 milliequivalents=1.3 milinormal 해당하는 이온을 교환처리 할 수 있음
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  • 답변

    성학모님의 답변

    첨부파일

    혈액단백질중 혈액응고에 관여하는 단백질로 피브리노겐(fibrinogen)을 정제해본 경험이 있습니다. 분자량이 330kD이므로 질문자의 시료와 유사하네요.
    이 단백질도 DEAE로 정제하고 있습니다.  10~20g/L정도 흡착됩니다.

    일반적으로 정제하는 단백질 정제의 레진을 선택하는 방법은
     1) meq/g dry 정보에 근거하여  여러종류 또는 제조사별 특성을 조사하여 1~3개 후보물질 선택
     2) 과량의 단백질을 사용하여 Binding capacity 실험(buffer조건)을 통해 가장 우수한 흡착력을 가지는 레진을 조사
     3) 일정수준이상의 결합력을 갖는 레진을 대상으로 용출조건 조사를 통해 고순도 정제가능한 레진을 최종선택
    혈액단백질중 혈액응고에 관여하는 단백질로 피브리노겐(fibrinogen)을 정제해본 경험이 있습니다. 분자량이 330kD이므로 질문자의 시료와 유사하네요.
    이 단백질도 DEAE로 정제하고 있습니다.  10~20g/L정도 흡착됩니다.

    일반적으로 정제하는 단백질 정제의 레진을 선택하는 방법은
     1) meq/g dry 정보에 근거하여  여러종류 또는 제조사별 특성을 조사하여 1~3개 후보물질 선택
     2) 과량의 단백질을 사용하여 Binding capacity 실험(buffer조건)을 통해 가장 우수한 흡착력을 가지는 레진을 조사
     3) 일정수준이상의 결합력을 갖는 레진을 대상으로 용출조건 조사를 통해 고순도 정제가능한 레진을 최종선택
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