2014-06-04
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박영환(youngh11)
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파우더로 된 PFA를 PBS에 녹여 4% PFA 용액을 만든 것과
35% formaldehyde 용액을 4% formaldehyde 용액으로 만든 것이 다른 건 가요?
제가 알기로는 PFA가 formaldehyde를 polymerization하여 고체화 시킨 것으로 알고 있는데 다른 것인가요?
35% formaldehyde 용액으로 4% formaldehyde 용액을 만드려고 하다가 선배한테 혼난 뒤 이렇게 써 봅니다.
35% formaldehyde 용액을 4% formaldehyde 용액으로 만든 것이 다른 건 가요?
제가 알기로는 PFA가 formaldehyde를 polymerization하여 고체화 시킨 것으로 알고 있는데 다른 것인가요?
35% formaldehyde 용액으로 4% formaldehyde 용액을 만드려고 하다가 선배한테 혼난 뒤 이렇게 써 봅니다.
- formaldehyde
- fixation
- 포르말린
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답변 4
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답변
조윤환님의 답변
2014-06-04- 1
반갑습니다.
제 생각에는 그 선배분이 뭔가 혼동을 하신게 아닌가 싶습니다.
35% 용액을 사용하나 PFA를 사용하나 결과는 같습니다.
대신 PFA가 PBS에 그냥은 녹지 않기 때문에 가열하면서 NaOH로 pH를 서서히 높여 주어야 합니다. 완전히 녹은 후에 HCl로 다시 pH를 맞춰야 합니다.
자세한 방법이 궁금하시면 formaldehyde solution protocol로 검색해보세요. 여러 가지가 나옵니다. -
답변
이배훈님의 답변
2014-06-04- 1
보통 세포 fixation에 4% PFA를
동물 조직에는 fixation 4% formaldehyde (10% formalin)
PFA는 고체라서 녹인후 사용시 fresh하고 짧은 시간에 세포를 고정하죠
동물 조직 고정은 10% formalin를 오랜기간 담그어 보관합니다.
(4% PFA와 4% formaldehyde와 같지만 fresh한 상태가 다르기에 용도를 달리 사용하는 것으로 추정)
참고고 gluaraldehyde는 강한 고정으로 인해 SEM 이용시( electron beam를 사용하는 기기에 사용합니다.)
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답변
박지상님의 답변
2014-06-09- 1
제가 알기로는 하고자 하는 method에 따라 다른 것으로 알고 있습니다.
fluorescence를 보고자 하면 pfa를 쓰고 IHC나 이런거 할 때는 formaldehyde를 쓰는 걸로 알고 있는데요..
이유는 머 formaldehyde를 formalin으로 만들어 쓸텐이 이게 autofluorescence를 같기 때문에 이걸 쓰지 않는 걸로 알고 있습니다. 위에 분들이 말씀하신게 틀린지 제가 맞는지는 잘 모르겠지만.. 제가 알기로 이러한 이유인 걸로 알고 있습니다. pfa도 머 결합하는게 있어서 그거 줄이려고 block 할때 glycine 넣어서 block해주고 하는데, 공부한지 오래되서 기억이.. abcam 책자 찾아서 보시면 도움이 되실 것입니다. -
답변
김상태님의 답변
2014-11-19- 0
Paraformaldehyde (chemical name is polyoxymethylene) is a powder of polymerized formaldehyde that by itself cannot fix tissues. To be usable as a tissue fixative, paraformaldehyde has to be dissolved in hot water to become a formaldehyde solution. Formalin is a saturated formaldehyde solution in water (37% by weight, 40% by volume) containing 10-15% methanol. Methanol is added to slow down the polymerization to formaldehyde, which reduces the fixing power of formalin. Formalin can also be made in an alcohol-free form from powdered paraformaldehyde