2014-06-19
org.kosen.entty.User@7eb7d8fe
박영환(youngh11)
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실험실에 있는 FACS antibody를 정리 하면서 의문이 든 부분이 있어서 질문을 남겨 봅니다.
FACS antibody 마다 host와 isotype이 모두 다르더군요.
그래서 생각이 든 것이, 보고자 하는 marker 이외에 isotype control은 형광 뿐만 아니라 isotype control도 바꿔써야 할 것 같은데, 이 실험실에서는 크게 생각을 하지 않더군요.
예를 들어 anti mouse CD4 PE의 경우 host는 Rat이고, isotype은 IgG2b 입니다.
저희 Lab에서는 isotype control로 Rat IgG2a isotype control PE를 가지고 있습니다.
Host는 같지만 anti mouse CD4 PE는 IgG2b
isotype control PE는 IgG2a
이렇게 isotype이 달라도 상관없는 것인가요?
그리고 그 외의 antibody를 살펴보면 host가 Rat 뿐만 아니라 armenian hamster, Mouse 등이 있고 , isotype은 IgG, IgG1, IgG2a, IgG2b, IgM 등이 있었습니다.
isotype을 맞추는게 중요할 것 같은데 저희 Lab에서는 크게 중요시하지 않는 것 같아서 답답하네요.
이 부분에 대해서 자세히 알려주시면 감사하겠습니다.
특히 isotype과 host와 관련하여
FACS antibody 마다 host와 isotype이 모두 다르더군요.
그래서 생각이 든 것이, 보고자 하는 marker 이외에 isotype control은 형광 뿐만 아니라 isotype control도 바꿔써야 할 것 같은데, 이 실험실에서는 크게 생각을 하지 않더군요.
예를 들어 anti mouse CD4 PE의 경우 host는 Rat이고, isotype은 IgG2b 입니다.
저희 Lab에서는 isotype control로 Rat IgG2a isotype control PE를 가지고 있습니다.
Host는 같지만 anti mouse CD4 PE는 IgG2b
isotype control PE는 IgG2a
이렇게 isotype이 달라도 상관없는 것인가요?
그리고 그 외의 antibody를 살펴보면 host가 Rat 뿐만 아니라 armenian hamster, Mouse 등이 있고 , isotype은 IgG, IgG1, IgG2a, IgG2b, IgM 등이 있었습니다.
isotype을 맞추는게 중요할 것 같은데 저희 Lab에서는 크게 중요시하지 않는 것 같아서 답답하네요.
이 부분에 대해서 자세히 알려주시면 감사하겠습니다.
특히 isotype과 host와 관련하여
- FACS
- isotype
- antibody
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
답변 1
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답변
이배훈님의 답변
2014-06-19- 0
isotype control은 같은 host에서 raised 된 같은 isotype에 부착된 fluorochrome를 사용하는 것이 원칙인 것으로 알고 있습니다. (보통 사용하는 항체의 바인딩이 specific 인지 또한 nonspecific인지를 confirm 하는 도구입니다.) 그래서 facs에서 isotype control은 nonspecific-background로 활용되고 있습니다.