2014-08-06
org.kosen.entty.User@6574de
나성숙(ssj0220)
- 1
잔여 selenium을 확인하기 위해서 Methylene Blue Reduction Test(MBRT)를 시행 중입니다.
기본 과정은 아래와 같습니다.
1. 5ml의 환원용액[20% (w/v) 1-thioglycerol in 0.2N phosphate buffer(pH 5.5)]에 시료(inorganic selenium을 포함하고 있는)를 넣는다.
2. 밀봉상태에서 10초간 섞어준다.
3. 3분 후, Mehthylene Blue 용액(2% w/v in DW)을 2방울 떨어뜨린다.
4. 밀봉상태에서 10초간 섞어준다.
5. 무색으로 전환되는 시간을 측정한다.
이 때 methylene blue가 탈색되는데 걸리는 시간에 따라서
0분 : 10ppm 이상
0.5~7분 : 10ppm
15~20분 : 매우 소량
으로 구분합니다. (eg. control sample은 90~150분 가량 걸림)
헌데 문제는 아무런 시료를 넣지 않고도
환원용액에 methylene blue를 한방울 떨어뜨렸을 때 MB가 완전히 탈색 되는데까지 3분정도 밖에 걸리지 않는다는 것입니다.
제 경우 0.2N Phosphate Buffer는 1N KH2PO4와 1N K2HPO4를 가지고 pH 5.5가 되게 200ml을 만들었고, 그 다음 1L가 되도록 DW로 희석하였습니다.
여기에 90% 1-thioglycerol이 20g 들어가게 계산하여 100ml의 환원용액을 만들었습니다.
어느 부분이 문제가 되는지 잘 모르겠습니다.
화학적으로 문제가 있는건지 혹은 이런 반응이 정상적인 반응인지 아시는 고수님이 계시다면 답변 좀 부탁드립니다.
P*S 제 경우 5ml의 환원용액에 20ul의 MB용액을 넣고 반응 시켰습니다.
또 탈색 중엔 투명한 용액이 완전히 탈색 된 후에는 용액 내에 불투명한 하얀 부유물 같은
물질이 생깁니다. 뭔가 관련이 있을지....
기본 과정은 아래와 같습니다.
1. 5ml의 환원용액[20% (w/v) 1-thioglycerol in 0.2N phosphate buffer(pH 5.5)]에 시료(inorganic selenium을 포함하고 있는)를 넣는다.
2. 밀봉상태에서 10초간 섞어준다.
3. 3분 후, Mehthylene Blue 용액(2% w/v in DW)을 2방울 떨어뜨린다.
4. 밀봉상태에서 10초간 섞어준다.
5. 무색으로 전환되는 시간을 측정한다.
이 때 methylene blue가 탈색되는데 걸리는 시간에 따라서
0분 : 10ppm 이상
0.5~7분 : 10ppm
15~20분 : 매우 소량
으로 구분합니다. (eg. control sample은 90~150분 가량 걸림)
헌데 문제는 아무런 시료를 넣지 않고도
환원용액에 methylene blue를 한방울 떨어뜨렸을 때 MB가 완전히 탈색 되는데까지 3분정도 밖에 걸리지 않는다는 것입니다.
제 경우 0.2N Phosphate Buffer는 1N KH2PO4와 1N K2HPO4를 가지고 pH 5.5가 되게 200ml을 만들었고, 그 다음 1L가 되도록 DW로 희석하였습니다.
여기에 90% 1-thioglycerol이 20g 들어가게 계산하여 100ml의 환원용액을 만들었습니다.
어느 부분이 문제가 되는지 잘 모르겠습니다.
화학적으로 문제가 있는건지 혹은 이런 반응이 정상적인 반응인지 아시는 고수님이 계시다면 답변 좀 부탁드립니다.
P*S 제 경우 5ml의 환원용액에 20ul의 MB용액을 넣고 반응 시켰습니다.
또 탈색 중엔 투명한 용액이 완전히 탈색 된 후에는 용액 내에 불투명한 하얀 부유물 같은
물질이 생깁니다. 뭔가 관련이 있을지....
- methylene blue
- thioglycerol
- selenium
지식의 출발은 질문, 모든 지식의 완성은 답변!
각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
답변 1
-
답변
안길홍님의 답변
2014-08-09- 1
첨부 자료에서 필요한 내용을 찾을 수 있기를 바랍니다.