2014-08-28
org.kosen.entty.User@20db9864
김응배(dmdqo4150)
- 1
안녕하세요.
콜라겐 분해효소 실험에 대해 궁금한게 있어서 문의드립니다.
Collagenase를 이용한 콜라겐 분해실험에서 Method를 보니
Tri-HCl(pH7.4)와 CaCl2에 콜라겐을 넣고 1시간가량 incubation 시킨뒤
Tris-HCl(pH7.4)와 collagenase(?? unit)를 동량 넣어서 분해경과를 지켜보는데요
1. Cacl2를 넣는 이유가 무엇때문인가요?
추측하기로는 collagenase activation을 위해 넣는거으로 보입니다만...
2. 혹시 생리식염수에서 콜라겐 효소분해 실험을 진행한다면 NaCl이 실험에 간섭할 가능성은 없나요?
답변 부탁드리며, 콜라겐 분해관련 참고할 만한 자료 있으시면 첨부좀 부탁드립니다.
행복한 하루 보내세요
콜라겐 분해효소 실험에 대해 궁금한게 있어서 문의드립니다.
Collagenase를 이용한 콜라겐 분해실험에서 Method를 보니
Tri-HCl(pH7.4)와 CaCl2에 콜라겐을 넣고 1시간가량 incubation 시킨뒤
Tris-HCl(pH7.4)와 collagenase(?? unit)를 동량 넣어서 분해경과를 지켜보는데요
1. Cacl2를 넣는 이유가 무엇때문인가요?
추측하기로는 collagenase activation을 위해 넣는거으로 보입니다만...
2. 혹시 생리식염수에서 콜라겐 효소분해 실험을 진행한다면 NaCl이 실험에 간섭할 가능성은 없나요?
답변 부탁드리며, 콜라겐 분해관련 참고할 만한 자료 있으시면 첨부좀 부탁드립니다.
행복한 하루 보내세요
- 콜라겐
- collagen
- collagenase
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변 1
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답변
이배훈님의 답변
2014-08-28- 2
Zn 이온이 콜라젠분해효소의 활성화에 꼭 필요하다고 합니다. (Zn 이온과 결합한 부위가 active site라고 합니다. Zn이온 His, Glu, Asp or Lys와 metal complex를 형성하여 촉매활성화를 시킨다고 합니다. 다행히 Zn이온은 collagenase제조시 이미 바인딩이 되어있어 추가로 첨가해 줄 필요는 없다고 합니다. 단지 칼슘이온은 collagenase의 활성도를 잘 유지 하고 (Zn 이온이 다른 chelating 분자로 인해 활성을 잃게하는 것을 방지하여 zn active site를 안정화시키는 역할) 콜라젠분자와 바인딩을 촉진한다고 합니다. Na이온이 없는 tris 버퍼를 쓰는 이유도 여기에 있네요.
Activators/Cofactors: Collagenase activity is stabilized
by 0.1 mole calcium ions (Ca2+) per mole of enzyme.4
Calcium ions also facilitate binding to the collagen
molecule.18 Zinc ions (Zn2+) are required for activity, but
are tightly bound to the collagenase during
purification.19 Additional Zn2+ should not be necessary
as long as no chelator is added during digestion.
답변 감사합니다.