2014-11-21
org.kosen.entty.User@45292577
이정환(li1225)
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KOSEN 선생님들께
안녕하세요, EDTA(ethylenediaminetetraacetic acid) 분석 관련하여 문의 드립니다.
EDTA가 처리된 Blood Bag 에 보관된 Blood로 부터 DNA를 Extraction 하고,
PCR (Polyermase Chain Reaction)하여 DNA 양을 정량 분석 하고 있습니다.
PCR 할때 EDTA가 Inhibitor 로 작용이 되기 때문에,
Elute (Tris-Hcl Buffer)내 EDTA의 존재 여부 및 양을 분석하고 싶습니다.
용액 내 존재하는 EDTA분석을 위하여
UV-VIS / IR / Raman / HPLC / NMR 등 어떤 방법을 사용하는 것이 가장 적합할지 문의 드립니다.
예시를 들어주시면 더욱 감사하겠습니다.
안녕하세요, EDTA(ethylenediaminetetraacetic acid) 분석 관련하여 문의 드립니다.
EDTA가 처리된 Blood Bag 에 보관된 Blood로 부터 DNA를 Extraction 하고,
PCR (Polyermase Chain Reaction)하여 DNA 양을 정량 분석 하고 있습니다.
PCR 할때 EDTA가 Inhibitor 로 작용이 되기 때문에,
Elute (Tris-Hcl Buffer)내 EDTA의 존재 여부 및 양을 분석하고 싶습니다.
용액 내 존재하는 EDTA분석을 위하여
UV-VIS / IR / Raman / HPLC / NMR 등 어떤 방법을 사용하는 것이 가장 적합할지 문의 드립니다.
예시를 들어주시면 더욱 감사하겠습니다.
- EDTA
- 농도
- 분석
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변 2
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답변
이상후님의 답변
2014-11-26- 2
첨부파일
만약 3차 증류수에 free EDTA가 녹아 있다면 HPLC로도 측정은 가능합니다. 그런데 tris-HCl buffer에 녹아 있는 EDTA를 측정하려면, 아마도 Fe 3가 이온과의 complexation 통한 Fe(III)-EDTA를 HPLC로 정량하는 방법이 좋을 듯 싶습니다. (아마, tris-EDTA + FeIII(aq) -------> FeIII-EDTA + tris)
컬럼 종류는 역상모드로 일반적인 C18 컬럼이면 가능할 거 같고, 250 nm나 258 nm 부근에서 absorbance를 측정하시면 될 거 같습니다. 관련 논문을 첨부하니 참고하시기 바랍니다.
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답변
김상태님의 답변
2014-12-07- 1
UV-VIS / IR / Raman / HPLC / NMR 에서 HPLC의 IR을 확인하거나 아님 FT-IR으로 확인하는 것도 확인 목적일경우 가능함
답변 감사 드립니다~