2015-01-24
org.kosen.entty.User@3df91f6e
전병만(jbm8282)
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첨부파일
column chromatography에서 의문점이 생겨 질문 드립니다.
이동상은 mc 100% 하였으며, tlc 사진 첨부하였습니다
[좌측 tlc: main spot은 가장 위의 것, mc 100%로 5회 올린 것]
이 조건으로 column을 진행하였습니다. mc 100%로 silica gel packing 하였고
반응물의 용매로 pyridine과 acetyl chloride를 사용하여 acetylation하였습니다.
work up은 농축 후 mc 10vol/H2O 20vol으로 slurry후 mc로 추출, 다시 농축하였습니다.
mc에 녹여 column loading 하였습니다
loading용매에서 pyridine의 냄새가 강하게 났습니다 그런데, loading에서 rf=0이던 spot [붉은색]이 바로 loading이 되었습니다 [사진첨부]
* packing의 문제인지, column에서 pyridine의 영향이 있는지 궁금합니다
* 이동상 / loading solvent / packing solvent 로 Mc의 장/단점이 궁금합니다.
이동상은 mc 100% 하였으며, tlc 사진 첨부하였습니다
[좌측 tlc: main spot은 가장 위의 것, mc 100%로 5회 올린 것]
이 조건으로 column을 진행하였습니다. mc 100%로 silica gel packing 하였고
반응물의 용매로 pyridine과 acetyl chloride를 사용하여 acetylation하였습니다.
work up은 농축 후 mc 10vol/H2O 20vol으로 slurry후 mc로 추출, 다시 농축하였습니다.
mc에 녹여 column loading 하였습니다
loading용매에서 pyridine의 냄새가 강하게 났습니다 그런데, loading에서 rf=0이던 spot [붉은색]이 바로 loading이 되었습니다 [사진첨부]
* packing의 문제인지, column에서 pyridine의 영향이 있는지 궁금합니다
* 이동상 / loading solvent / packing solvent 로 Mc의 장/단점이 궁금합니다.
- pyridine
- column
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변 1
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답변
조윤환님의 답변
2015-01-26- 2
반갑습니다.
workup과정에서 pyridine을 충분히 제거하는 것이 좋습니다. column에도 문제를 일으킬 수 있고, 연구자의 건강에도 좋지 않죠.
가급적 pyridine의 사용은 피하는 것이 좋습니다. 고체인 DMAP나 TEA 또는 TEA/DMAP 0.1eq로 해보시길 권합니다.
column chromatography 용매로 MC 단독으로 사용은 경우에 따라 좋지 않은 결과를 가져오는 경우가 많더군요. 충진 상태가 좋지 않은 경우가 많습니다. TLC로 판단할 때 5번 반복 전개해서 Rf값이 0.5 정도라면 좀더 극성이 높은 용매를 섞어서 사용하는 것이 좋을 듯 싶습니다.
일반적으로 타겟 스판의 Rf가 0.3~0.4 정도로 분리 조건을 잡아서 분리하는 경우가 많습니다.
column의 상태로 볼 때 Rf= 0에 있었던 붉은색이 전체적으로 나오는 것은 피리딘 때문일수도 있고, 실리카겔의 양이 적은 것이 원인일 수 있습니다.
실리카겔은 보통 시료량에 25배에서 50배 정도를 사용하는 것이 일반적입니다. 피리딘은 극성은 물론이고 이동상으로서 eluting power가 매우 높은 물질입니다. TLC를 올릴 때도 용매도 사용한 pyridine이 TLC 판에 남아 있으면 rf값에 영향을 미칩니다. 보통은 이 때문에 올릴 때마다 rf값이 조금씩 달라지죠. 때문에 이런 경우에는 TLC 점적 후 TLC판을 살짝 가열해서 진공상태에서 충분히 pyridine을 제거한 후에 전개시킵니다. 따라서 컬럼을 할 때도 workup과정에서 pyridine을 충분히 제거해야 TLC로 예측한 결과를 얻을 수 있습니다.
조윤환(brmdolee) 2015-01-26Hex:EA 시스템 사용시 용해도 문제가 발생하는 경우가 종종 있습니다. 그런 경우 MC/Acetone 또는 MC/MeOH 등의 용매 시스템을 사용하곤 합니다. 혼합비를 조절해서 원하는 rf값을 얻은 후 컬럼하시면 됩니다.
먼저, 쉽게 설명해주셔서 많은 공부가 되었습니다 감사합니다.
column sample이 Hx:EA = 1.5:1 에서 Rf=0.3~0.4값을 보이지만, 용해도가 매우 낮아 tailing이 심하게 일어나며 mc에는 비교적 잘 녹아 eluent로 선택하였습니다.
column시 용해도가 낮을 때에는 어떤 좋은 해결 방법이 있는지 궁금합니다