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지식나눔

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Bone marrow cell culture 관련 질문드립니다

2015-04-02 org.kosen.entty.User@6b615f3e 최백동(flyingdog95)
  • 2
Mouse tibia 에서 bone marrow cell 추출해서 osteoclast differentiation 실험 예정에 있습니다.
monocyte 분리하는 Ficoll paque premium 사용하려고 했으나 species가 human 뿐이라 다른걸로 찾아보고 있는데 혹시 아시는 제품 있으시면 답변 부탁드립니다~
 
  • mouse
  • bone marrow cell
  • monocyte
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답변 2
  • 답변

    장성재님의 답변

    2015-04-02
    • 2

    첨부파일

    Murine monocyte를 tibia에서 분리하는 방법이라면 첨부한 논문을 참고하시길 바랍니다.
    답변수정
    Murine monocyte를 tibia에서 분리하는 방법이라면 첨부한 논문을 참고하시길 바랍니다.
    최백동(flyingdog95) 2015-04-06

    친절히 첨부파일까지~ 많은 도움이 되었습니다. 감사합니다!

  • 답변

    배소현님의 답변

    2015-04-03
    • 2

    첨부파일

    GE healthcare에서 mononuclear cell 분리하는 Ficoll-Paque product를 판매하는데 이렇게 써 있네요. Protocol 첨부합니다.

    “Recommended for small- or large-scale isolation of viable mononuclear cells in high yield from whole human
    peripheral blood, bone marrow, and umbilical cord blood.”

    "Ficoll-Paque products can also be used to prepare purified mononuclear cells from sources other than human peripheral blood."

    여기 6 page에도 나와 있지만, 가장 중요한 tip (제 경험으로는)
    1. Ficoll 위에 blood sample을 아주 천천히 가해주어서 층이 깨지지 않게 유지하는 기술
    2. Centrifuge 가 swing rotor로 되어 있어야 할 것
    3. Centrifuge의 brake는 반드시 꺼야 함.

    1번은 아는데도 잘 안 되더군요…기술이 부족해서…

    답변수정

    GE healthcare에서 mononuclear cell 분리하는 Ficoll-Paque product를 판매하는데 이렇게 써 있네요. Protocol 첨부합니다.

    “Recommended for small- or large-scale isolation of viable mononuclear cells in high yield from whole human
    peripheral blood, bone marrow, and umbilical cord blood.”

    "Ficoll-Paque products can also be used to prepare purified mononuclear cells from sources other than human peripheral blood."

    여기 6 page에도 나와 있지만, 가장 중요한 tip (제 경험으로는)
    1. Ficoll 위에 blood sample을 아주 천천히 가해주어서 층이 깨지지 않게 유지하는 기술
    2. Centrifuge 가 swing rotor로 되어 있어야 할 것
    3. Centrifuge의 brake는 반드시 꺼야 함.

    1번은 아는데도 잘 안 되더군요…기술이 부족해서…

    최백동(flyingdog95) 2015-04-06

    감사합니다~ 혹시 선생님께서 ficoll을 사용해서 실험을 하신건가요?

    배소현(baesohyun) 2015-04-07

    예.. 몇 년 전에요 ㅠ
    그 때 경험 많은 연구원으로부터 배우면서 실험했는데
    그때 그 연구원께서 세가지 주의사항을 엄청 강조하시더라고요.
    Peipheral blood와 bone marrow cell 로부터 monocyte 분리했는데
    잘 분리되더군요.^^

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