2015-09-08
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김동우(black1004kiss)
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cell을 이용하여 protein을 expression하려고 합니다. 아직 시설이 갖추어지지 않아 필요한 cell이며 incubator며 사야 하는데 예산이 얼마나 소모될지 알고 싶습니다.
발현하고자 하는 protein은 human protein입니다. 어떤 cell을 이용하는 것이 경제적으로 좋을까요? 효율성과 경제성을 모두 갖춘 cell과 방법을 알고 싶습니다.
발현하고자 하는 protein은 human protein입니다. 어떤 cell을 이용하는 것이 경제적으로 좋을까요? 효율성과 경제성을 모두 갖춘 cell과 방법을 알고 싶습니다.
- protein
- expression
- cell
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변 6
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답변
정철웅님의 답변
2015-10-06- 2
mammalian 세포를 이용할 경우 고비용이 들기는 하지만 original post translational modification이 다 되는 장점이 있습니다. 따라서 glycosylation등을 고려 안한다면 e coli 나 yeast를 사용하는 것이 경제적으로는 좋습니다. 그리고, Hela 보다는 CHO나 HEK293세포가 단백질 생산용으로 많이 사용되고 transient expression 연구도 많이 되어 있습니다. 특히 산업화 가능성이 있는 것은 293에서 테스트 해보고 CHO에서 stable cell line 만드는 것이 일반적입니다.
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김형택님의 답변
2015-09-08- 1
클린벤치, 인큐베이터, 센트리퓨즈, 5ml, 10ml 파이펫, 파이펫 에이드, 2, 10, 200, 1000p 파이펫 세트,
15ml, 50ml 튜브, 장갑, 마스크, 미디어, Trypsin, PBS 적고 보니 많네요. 회사가 워낙 많아서 가격이 다르므로 견적은 직접 알아보시는게 더 편하실것 같습니다. 세포는 Hela 세포가 키우기도 편하니 괜찮을 것 같네요.
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이배훈님의 답변
2015-09-09- 1
BD bioscience 등 다양한 회사회사로 부터 세포실험실 관련 시설 견적을 받아보시는 게 좋을 것 같습니다.
그리고 세포종류별로 발현하는 특성 단백질들이 다르기 때문에 원하시는 특성 단백질에 맞는 세포를 이용해야할 것 같습니다. -
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황규찬님의 답변
2015-09-11- 1
1) cell을 이용하여 protein을 expression하려고 합니다. 아직 시설이 갖추어지지 않아 필요한 cell이며 incubator며 사야 하는데 예산이 얼마나 소모될지 알고 싶습니다.
- 규모에 따라 단지 확인용인지 산업용인지에 따라 다양합니다.
2) 발현하고자 하는 protein은 human protein입니다. 어떤 cell을 이용하는 것이 경제적으로 좋을까요? 효율성과 경제성을 모두 갖춘 cell과 방법을 알고 싶습니다.
- 발현된 human protein을 정제하여 사용 목적에 따라 다르겠습니다. 우선 바이오신약으로서 사용하고자 한다면 여러 post-translation modification에 따라 단백질의 활성 및 가치가 달라지므로 human cell (Hela 등)과 다른 eukaryotic cell등을 고려하셔야 합니다. 특히, 경우에 따라 Hela 세포를 필요에 따라 형질전환시켜 발현하고자 하는 단백질에 최적화 시킬 필요도 있습니다. 많은 고려사항들에 대해 숙고하셔야 합니다. -
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김동수님의 답변
2015-11-18- 1
자체시설을 고려하시는군요. 산발적으로 보지 마시고 소규모 단백질생산을 위한 랩스케일을 알아보시면 됩니다. 오송 케이바이오 시설을 보면 이런 파일럿시설이 잘되어 있는데요, 소형배양시설 및 고발현용 세포주의 발현시스템화가 랩스케일에서는 최적이더군요. 싸토리우스코리아 기술팀에 문의하시면 도움되실겁니다. 도움이 되셨기를 바랍니다. -
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박성훈님의 답변
2016-01-21- 1
물론 목적에 따라 다르지만, 위에서 언급하신 human cell lline에서 얻고자 하시면, 여러가지 요소를 살펴보셔야 할것 같습니다. 단일 단백질의 경우, human cell lilne에서 정제하신 단백질은 여러 단백질이 같이 바인딩 되어진 채로 elution하시게 됩니다. 그래서 경우에 따라 목적에 따라 다르지만, 대체적으로는 서로 다른 species에서 발현 하시는 것을 좀더 추천 드립니다. 물론 비용적인 면에서도...
여러가지 조건들은 살펴 보시고, 셋팅 하시는 것도 좋은 방법 중에 하나입니다.