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항생제 내성 검사 방법이 궁금합니다.

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안녕하세요 항생제 내성 검사 방법이 궁금합니다.

세균 컬쳐 후, grid에 나누거나 혹은 첨부한 사진처럼 petri dish에 직접 찍어서
여러 항생제를 처리하여 균이 죽는지 육안으로 확인하는 방법이 가장 기본적인 방법인가요?
kit라던가 혹은 간단하고 일반적인 항생제 내성 검사 방법이 궁금합니다.

더하여 각 단계마다 대략적인 소요시간도 궁금합니다.

아시는 부분만이라도 답변 부탁드립니다.
감사합니다.
  • 항생제
  • antibiotic
  • 내성
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답변 5
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    이상후님의 답변

    disc법은 쉽게 말해, 앞선 답변자분들께서 설명한대로 clear zone 형성 유무와 크기 등으로 내성 유무를 판단합니다. 이 방법은 아마 쉽게 인터넷 검색만으로도 알 수 있을 거 같구요.
    다른 방법중에 하나로, 내성 유전자 검사로 알 수 있는 방법이 있습니다. 사실 이 방법이
    가장 확실하고 명확한 방법이라고 볼 수 있죠.
    disc법은 쉽게 말해, 앞선 답변자분들께서 설명한대로 clear zone 형성 유무와 크기 등으로 내성 유무를 판단합니다. 이 방법은 아마 쉽게 인터넷 검색만으로도 알 수 있을 거 같구요.
    다른 방법중에 하나로, 내성 유전자 검사로 알 수 있는 방법이 있습니다. 사실 이 방법이
    가장 확실하고 명확한 방법이라고 볼 수 있죠.
    권정희(buny89) 2015-10-29

    혹시 내성 유전자 분석 기관 추천하실만한 데 있음 부탁드립니다.

    미생물 유전학 랩에서는 대부분 분석이 가능합니다만, 혹시 임상미생물 내성 유전자 검출이 목적이라면, 국내 reference lab(녹십자의료재단이나 씨젠의료재단 등에서 분석이 가능합니다).

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    김동현님의 답변

    제가 알기로는 올려주신 첨부파일 처럼 배지위에 세균을 배양하고 항생제를 처리하여 육안으로 저해정도를 확인하는 것이 가장 기본적인 것으로 알고 있습니다. 그리고 나서 활성과 내성이 확인된 항생제를 배양액에 배양된 세균에 여러가지 농도로 처리하여 minimum inhibitory concentration (MIC)를 구하는 것이 다음 단계가 될 수 있겠네요. 이 농도를 비교해보면 어느정도 내성이 생겼는지 쉽게 비교할 수 있을듯 합니다.
    제가 알기로는 올려주신 첨부파일 처럼 배지위에 세균을 배양하고 항생제를 처리하여 육안으로 저해정도를 확인하는 것이 가장 기본적인 것으로 알고 있습니다. 그리고 나서 활성과 내성이 확인된 항생제를 배양액에 배양된 세균에 여러가지 농도로 처리하여 minimum inhibitory concentration (MIC)를 구하는 것이 다음 단계가 될 수 있겠네요. 이 농도를 비교해보면 어느정도 내성이 생겼는지 쉽게 비교할 수 있을듯 합니다.
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    성학모님의 답변

    shark118님이 핵심방법 2가지를 제시해주셨습니다.
    자세한 내용은 아래 내용을 참고하시기 바랍니다.

    [ 항생제 감수성의 측정 ]
    분리한 Enterococcus의 항생제 감수성은 disk diffusion test와 한천 희석방법을 이용하여 수행하였다(30). 대상 항생제는 National Committee for Clinical Laboratory Standards(NCCLS)에서 Enterococcus의 항생제 검사로 추천된 vancomycin, penicillin, chloramphenicol, tetracycline, rifampicin, streptomycin, ampicillin과 erythromycin을 사용하였다(31). Muller-Hilton(MH) broth(Oxoid)에서 배양된 배양액을 MH 한천배지에 항생제를 단계별로 희석하여 첨가한 배지에 접종기구를 이용하여 접종한 후 37oC에서 24시간 배양하였다. 최소생육저해농도(minimum inhibitory concentration, MIC)는 각각의 항생제가 첨가된 배지에서 균주가 증식하지 않는 최소농도로 결정하였다. 또한 disk diffusion test를 위해서는 MH에서 전배양된 분리균주를
    MH 한천배지 위의 disk에 분주하여 37oC에서 24시간 배양하였다.

    상기내용은 콩발효식품에서의 장구균과 항생제 내성특성이란 논문에서 발취하였습니다.
    한국식품영양과학회지, J Korean Soc Food Sci Nutr 41(5), 714~720(2012)
    shark118님이 핵심방법 2가지를 제시해주셨습니다.
    자세한 내용은 아래 내용을 참고하시기 바랍니다.

    [ 항생제 감수성의 측정 ]
    분리한 Enterococcus의 항생제 감수성은 disk diffusion test와 한천 희석방법을 이용하여 수행하였다(30). 대상 항생제는 National Committee for Clinical Laboratory Standards(NCCLS)에서 Enterococcus의 항생제 검사로 추천된 vancomycin, penicillin, chloramphenicol, tetracycline, rifampicin, streptomycin, ampicillin과 erythromycin을 사용하였다(31). Muller-Hilton(MH) broth(Oxoid)에서 배양된 배양액을 MH 한천배지에 항생제를 단계별로 희석하여 첨가한 배지에 접종기구를 이용하여 접종한 후 37oC에서 24시간 배양하였다. 최소생육저해농도(minimum inhibitory concentration, MIC)는 각각의 항생제가 첨가된 배지에서 균주가 증식하지 않는 최소농도로 결정하였다. 또한 disk diffusion test를 위해서는 MH에서 전배양된 분리균주를
    MH 한천배지 위의 disk에 분주하여 37oC에서 24시간 배양하였다.

    상기내용은 콩발효식품에서의 장구균과 항생제 내성특성이란 논문에서 발취하였습니다.
    한국식품영양과학회지, J Korean Soc Food Sci Nutr 41(5), 714~720(2012)
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    홍성욱님의 답변

    항생제 내성 측정 및 mic결정용으로, 한 strip에 다양한 농도의 항생제가 들어 있어서, 균을 spreading한 배지에 strip을 올려놓으면, 적정농도 이상으로는 strip주위에 균이 자라지 않아서 손쉽게 확인할 수 있는 제품(?)이 있습니다.
    항생제 내성 측정 및 mic결정용으로, 한 strip에 다양한 농도의 항생제가 들어 있어서, 균을 spreading한 배지에 strip을 올려놓으면, 적정농도 이상으로는 strip주위에 균이 자라지 않아서 손쉽게 확인할 수 있는 제품(?)이 있습니다.
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    성학모님의 답변

    Diffusion test를 통해 표준농도대비 저해환 크기로 저해효과를 측정하는 물질은 수용성으로 확산이 가능해야합니다. 확산이 원활하지 않은 소수성인 물질은 시험이 곤란할수 있습니다.

    소수성을 물질을 포함하여 대부분의 항생물질의 항균성을 평가하려면 단계적으로 희석되어 일정농도로 세균이 존재하는 배지에 일정농도의 항생제를 첨가하여 일정시간 배양한후 목적하는 세균에 맞는  고체배지위에 sprading하여 균수를 측정함으로 균 저해농도를 측정할수 있습니다.
     
    Diffusion test를 통해 표준농도대비 저해환 크기로 저해효과를 측정하는 물질은 수용성으로 확산이 가능해야합니다. 확산이 원활하지 않은 소수성인 물질은 시험이 곤란할수 있습니다.

    소수성을 물질을 포함하여 대부분의 항생물질의 항균성을 평가하려면 단계적으로 희석되어 일정농도로 세균이 존재하는 배지에 일정농도의 항생제를 첨가하여 일정시간 배양한후 목적하는 세균에 맞는  고체배지위에 sprading하여 균수를 측정함으로 균 저해농도를 측정할수 있습니다.
     
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