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지식나눔

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dsDNA와 ssDNA 섞일 시, annealing 그대로 해도 되나요?

2016-02-03 org.kosen.entty.User@184d2ee7 김주혁(kjh5703)
  • 1

제가 dsDNA와 ssDNA가 섞인 sample이 있는데 전부 dsDNA로 있기를 바란다면,


이 상태로 어떻게 annealing하면 좋을까요?? size는 0.1~2kb이며, 농도는 total


dsDNA 2ug, ssDNA 5ug 정도입니다. 단순히 annealing protocol 찾아서 수행해도


무방할까요?

  • DNA
  • Annealing
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답변 1
  • 답변

    김용규님의 답변

    2016-02-04
    • 2

    첨부파일

    고온 (섭씨 90-95도)에서 3-5분 정도 DNA를 완전 denature 시킨 후에 저온에서 annealing 해보길 추천합니다. 4도나 상온(25도)에서 천천히 적어도 10분이상 annealing 해 보시길 추천합니다. EtBr은 dsDNA와 결합하기 때문에 annealing 후에 젤 상에 annealing efficiency를 qualitative하게 확인할 수 있습니다.
    답변수정
    고온 (섭씨 90-95도)에서 3-5분 정도 DNA를 완전 denature 시킨 후에 저온에서 annealing 해보길 추천합니다. 4도나 상온(25도)에서 천천히 적어도 10분이상 annealing 해 보시길 추천합니다. EtBr은 dsDNA와 결합하기 때문에 annealing 후에 젤 상에 annealing efficiency를 qualitative하게 확인할 수 있습니다.
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