2016-02-03
org.kosen.entty.User@495950f
김주혁(kjh5703)
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제가 dsDNA와 ssDNA가 섞인 sample이 있는데 전부 dsDNA로 있기를 바란다면,
이 상태로 어떻게 annealing하면 좋을까요?? size는 0.1~2kb이며, 농도는 total
dsDNA 2ug, ssDNA 5ug 정도입니다. 단순히 annealing protocol 찾아서 수행해도
무방할까요?
- DNA
- Annealing
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변 1
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답변
김용규님의 답변
2016-02-04- 2
첨부파일
고온 (섭씨 90-95도)에서 3-5분 정도 DNA를 완전 denature 시킨 후에 저온에서 annealing 해보길 추천합니다. 4도나 상온(25도)에서 천천히 적어도 10분이상 annealing 해 보시길 추천합니다. EtBr은 dsDNA와 결합하기 때문에 annealing 후에 젤 상에 annealing efficiency를 qualitative하게 확인할 수 있습니다.