2016-02-05
org.kosen.entty.User@11aea994
정신구(dropsboy)
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mouse neural stem cell (mNSC) 을 배양하고 있습니다.
mNSC를 neuron으로 분화시키는 method (protocol)을 알려주실수 있을까요..
protocol을 보내주시면 정말 감사하겠습니다. 도와주세요..
mNSC를 neuron으로 분화시키는 method (protocol)을 알려주실수 있을까요..
protocol을 보내주시면 정말 감사하겠습니다. 도와주세요..
- Neural stem cell
- Neuron
- differentiation
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변 2
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답변
이보람님의 답변
2016-02-12- 3
안녕하세요.
뉴런 분화시키는 방법을 참조할 만한 논문과 관련 방법을 알려 드립니다.
아래 논문을 참조하면 쉽게 뉴런으로 분화시킬 수 있습니다.
Kim JB, H Zaehres, G Wu, L Gentile, K Ko, V Sebastiano, MJ Arauzo-Bravo, D Ruau, DW Han, M Zenke and HR Scholer. (2008). Pluripotent stem cells induced from adult neural stem cells by reprogramming with two factors. Nature 454:646-50.
Neural Differentiation of mNSCs
1. NSCs were seeding 1 x 104 cells onto a PDL/laminin coated 4-well plate
2. Seeded Cells were treated for 5–7 d with DMEM/F12 medium supplemented with B27 plus
10 ng/ml FGF-2
3. After treated above medium, thten switched to DMEM/F12:Neurobasal medium (1:1) supplemented
with B27, 0.5 X N2, and no growth factors.
4. Observe the neuron morphology.
5. Confirm differentiated neurons from mNSCs with Immunocytochemistry (Tuj1 etc)
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답변
성은수님의 답변
2016-03-24- 2
저는 Primary mNSC 실험중인데요. 저는 신경으로 분화하는데 NeuroCult™ Basal Medium (Mouse) +NeuroCult™ Differentiation Supplement (Mouse), stem cell technologies 제품을 구입해서 사용합니다. medium change는 이틀에 한번 50% exchange 입니다.그리고 7일간 분화후 분화마커 확인 (I.C.C, W.B), 잘 아시겠지만 분화 할때 분비되는 인자들이 있으니 전부 체인지 하시면 안되는걸로 알고 있습니다.
-분화 미디어 reagents 비율을 보시면 아시겠지만 여러가지를 mix합니다.
직접 mix해서 만들어서 사용하시거나 만들어진것을 구입해서 사용하는 것은 연구자의 결정이지만 가격 비교해서 선택하시고, 만들어진거 구입할때는 꼭 pub., ref 참고하세요.~
감사합니다!!