2016-02-14
org.kosen.entty.User@671ea023
장미옥(bestwife76)
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키토산 올리고당을 배지에 첨가해 최종 유용 물질 생산을 목적으로 실험하고 있습니다
금번 실험은 고체 배양으로 진행되는 cell에 변화를 주고자 고체 배지에 키토산 올리고당을 첨가했습니다
1. 배지를 멸균 후 약간 식힌 다음 배지 온도가 60~70도 정도 됐을 때 무균적으로 filter sterilized chitosan oligosaccharide 를 첨가했습니다.
2. 키토산 올리고당이 물에 잘 녹으므로 파우더로 된 키토산 올리고당을 배지 조제 시에 첨가하여 완전히 녹인 후 pH 조정하여 멸균하였습니다
첫번째 방법으로 조제된 고체 배지에서는 키토산 올리고당이 하얗게 비규칙적으로 뭉쳤습니다
마치 계란 흰자를 뜨거운 물에 풀어서 젓가락으로 저으면 생기는 하얀색 응어리 형태로요
이 때 활성탄의 뭉침 현상은 보이지 않았습니다.
두번째 방법으로 조제된 고체배지는 앞의 방법에서 나타난 하얀색 응어리는 없었는데 활성탄이 중간 중간에 모이는 현상이 발생했습니다.
왜 이런 현상이 일어나는 것이며 어떻게 실험을 진행하는 것이 제가 목적하는 실험을 진행할 수 있을지 답변 부탁드립니다
참고로 유사한 실험을 액체 배지를 이용해서 진행했을 때 키토산 올리고당이 뭉치는 것은 전혀 관찰되지 않았고 액체배지는 키토산 올리고당 150 mg/L 로 사용했고 고체 배지는 20mg/L 가 되게 배지를 조제했습니다 또한, 고체배지에는 gelrite라는 gelling agent (agar 성분)와 activated charcoal 이 포함되어 있었습니다
금번 실험은 고체 배양으로 진행되는 cell에 변화를 주고자 고체 배지에 키토산 올리고당을 첨가했습니다
1. 배지를 멸균 후 약간 식힌 다음 배지 온도가 60~70도 정도 됐을 때 무균적으로 filter sterilized chitosan oligosaccharide 를 첨가했습니다.
2. 키토산 올리고당이 물에 잘 녹으므로 파우더로 된 키토산 올리고당을 배지 조제 시에 첨가하여 완전히 녹인 후 pH 조정하여 멸균하였습니다
첫번째 방법으로 조제된 고체 배지에서는 키토산 올리고당이 하얗게 비규칙적으로 뭉쳤습니다
마치 계란 흰자를 뜨거운 물에 풀어서 젓가락으로 저으면 생기는 하얀색 응어리 형태로요
이 때 활성탄의 뭉침 현상은 보이지 않았습니다.
두번째 방법으로 조제된 고체배지는 앞의 방법에서 나타난 하얀색 응어리는 없었는데 활성탄이 중간 중간에 모이는 현상이 발생했습니다.
왜 이런 현상이 일어나는 것이며 어떻게 실험을 진행하는 것이 제가 목적하는 실험을 진행할 수 있을지 답변 부탁드립니다
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- 키토산 올리고당
- gelrite
- activated charcoal
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변 3
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답변
이호진님의 답변
2016-02-16- 2
키토산 올리고당이 여러 종류의 분자량을 가져서.. 말씀하신 현상이 나타나지 않을까 합니다 (링크 확인). 따라서 키토산 올리고 당의 필터로 여과해서 사용하시면 분자량이 적어져서 뭉치는 현상을 없어 질 것 같아요. 다음 논문의 실험 방법을 한 번 읽어보세요.
https://www.cheric.org/PDF/PK/PK38/PK38-1-0085.pdf
도움이 되길 바랍니다.
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답변
성학모님의 답변
2016-03-08- 2
음식백과사전에 따르면 키토산 올리고당은숫수산화나트륨으로 탈아세틸화시킨 키토산을 효소 처리하여 당의 수가 2~10개인 것을 얻어낸 것을 말한다. 키토산은 N-acetyl-D-glucosamine과 D-glucosamine이 β-(1, 4) 결합한 고분자 다당체로서 분자 중 D-glucosamine 비율이 60% 이상으로 묽은 산에 녹는 것을 총칭해서 일컫는다.
보통 뭉치는 현상은 열이나 pH에 의해 각 분자들이 가역적 또는 비가역적으로 결합을 해서 발생합니다. 특히 불안정성이 높거나 극성이 강한 화합물일 경우(sulfate기 등) 뭉치는 현상이 잘 나타나며, 불용성 조건에서는 침전형태로 나타납니다. 키토산은 낮은 pH에서 용해도를 갖는 다고 한다면 뭉치는 현상은 배지의 pH가 높아서 발생될수도 있을 것같습니다.
낮은 pH 조건에서는 배지성분중에 단백질이 포함된 경우 뿌옇게 변한후에 침전이 발생될수 있습니다.
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답변
김동수님의 답변
2016-02-24- 1
를 바꾸시어 플레이트를 최종 만드신후 첨가하시고자 하는 키토산올리고당을 준비하시어 액체상태로 도말하여 건조하시면 되지 않을까요? 굳이 배지준비단계에 넣으실 필요는없을실것 같습니다. 좋은 결과있으시길 믿습니다. 도움이 되셨나요?