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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
답변 3
  • 답변

    김용규님의 답변

    맞습니다. 1ml, 100ul PBS에 녹이면 각각 100ug/ml, 1mg/ml 가 됩니다.

    처음에 용액 상태로 사셨을때 필터(0.2um)된 PBS에 용해되었다고 하니 ab 안정성을 위해 필터후 중성 pH (around pH 7.4)의 PBS를사용하시는게 나을 듯 싶습니다. 
    맞습니다. 1ml, 100ul PBS에 녹이면 각각 100ug/ml, 1mg/ml 가 됩니다.

    처음에 용액 상태로 사셨을때 필터(0.2um)된 PBS에 용해되었다고 하니 ab 안정성을 위해 필터후 중성 pH (around pH 7.4)의 PBS를사용하시는게 나을 듯 싶습니다. 
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  • 답변

    장성재님의 답변

    첨부하신 certificate의 동결건조된 항체를 어떻게 reconsitution하는 지에 대한 질문이시군요.

    Formulation에 "Lyophilized from 100 uL of a a 0.2 um filtered solution in PBS, pH 7.4 with 5% Trehalose."라고 되어 있습니다.

    그리고 Reconstitution에는 "Reconstitute at 0.2 mg/mL in sterile PBS"라고 되어 있습니다. 0.2 mg/mL의 농도도 녹이라고~ 즉, sterile PBS 500 uL에 녹이라는 말이겠죠.

    사실 위 Formulation 내용대로 라면 염 농도를 유지하기 위해서 sterile DW(증류수) 100 uL에 녹이신 후 sterile PBS로 원하시는 농도로 희석하여 원하시는 양으로 분주하셔서 냉동 보관하고 사용하시는 것이 맞습니다. 

    따라서, 원래 사용하셨던 1 mg/mL의 농도로 보관하시려면 100 uL의 증류수를 넣어 녹이는 것이 맞습니다. 하지만 이때 제조사가 권장한 방법으로 sterile PBS에 희석하신다면 saline 및 phosphate의 농도는 2배가 되겠죠....(어차피 항체를 반응시키실 때에는 많이 희석을 하셔서 사용하시기 때문에 무방하겠지만 냉장 보관하실 거면 영향이 있을 수도~, certificate에는 냉장 보관 시에는 1개월 안정하다고 써 있네요^^)

    전 제조사에서 권장하는 방법을 주로 사용합니다. 그래야 나중에 문제가 생기더라도 이의를 제기할 수 있으니까~
    첨부하신 certificate의 동결건조된 항체를 어떻게 reconsitution하는 지에 대한 질문이시군요.

    Formulation에 "Lyophilized from 100 uL of a a 0.2 um filtered solution in PBS, pH 7.4 with 5% Trehalose."라고 되어 있습니다.

    그리고 Reconstitution에는 "Reconstitute at 0.2 mg/mL in sterile PBS"라고 되어 있습니다. 0.2 mg/mL의 농도도 녹이라고~ 즉, sterile PBS 500 uL에 녹이라는 말이겠죠.

    사실 위 Formulation 내용대로 라면 염 농도를 유지하기 위해서 sterile DW(증류수) 100 uL에 녹이신 후 sterile PBS로 원하시는 농도로 희석하여 원하시는 양으로 분주하셔서 냉동 보관하고 사용하시는 것이 맞습니다. 

    따라서, 원래 사용하셨던 1 mg/mL의 농도로 보관하시려면 100 uL의 증류수를 넣어 녹이는 것이 맞습니다. 하지만 이때 제조사가 권장한 방법으로 sterile PBS에 희석하신다면 saline 및 phosphate의 농도는 2배가 되겠죠....(어차피 항체를 반응시키실 때에는 많이 희석을 하셔서 사용하시기 때문에 무방하겠지만 냉장 보관하실 거면 영향이 있을 수도~, certificate에는 냉장 보관 시에는 1개월 안정하다고 써 있네요^^)

    전 제조사에서 권장하는 방법을 주로 사용합니다. 그래야 나중에 문제가 생기더라도 이의를 제기할 수 있으니까~

    ^^

  • 답변

    홍성욱님의 답변

    reconstitution 가이드에 따라서 0.2 mg/ml로 PBS에 녹이시면 될 것 같습니다. 
    더 높은 농도로 녹이면 SOLUBILITY 측면에서 문제가 생길 가능성도 있습니다.
    reconstitution 가이드에 따라서 0.2 mg/ml로 PBS에 녹이시면 될 것 같습니다. 
    더 높은 농도로 녹이면 SOLUBILITY 측면에서 문제가 생길 가능성도 있습니다.
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